环状RNA的检测表达问题

OligoDT引物不能用于环状RNA反转cDNA。环状RNA的引物设计一般为15-25 bp，常用的是18-23 bp，不建议大于30bp，因为过长会导致其退火温度过高，不适于定量PCR反应。

环状RNA是一种特殊的RNA分子，它们是通过环状结构形成的，而不是线性的。在进行环状RNA反转录成cDNA时，通常需要使用特异性引物或随机引物进行引物导向合成。这是因为Oligo-dT引物只能与线性RNA的3'末端结合，而环状RNA没有3'末端，所以不能使用Oligo-dT引物。

环状RNA的特异性引物设计一般需要考虑多种因素，如环状RNA的结构、序列和表达水平等。通常，引物长度越长，特异性越高，但同时也会增加引物合成和纯化的难度。一般来说，环状RNA特异性引物长度在20-25个核苷酸左右为宜。