柱提RNA是否可以用Trizol？

dxy_ee91avc4

2022-10-24

请问各位，如果想把柱提法的裂解液换成Trizol，后续步骤建议如何改进呢？

是悬浮淋巴细胞，每个样大概100万个细胞左右。用柱提法提出来的纯度够，但是浓度非常低（有的甚至只有个位数）

想两者结合，使用柱提法，然后把裂解液换成裂解能力更强的Trizol。

试过几次，直接把柱提法步骤里的裂解液换成了Trizol（其他步骤不变），测出来的浓度够了，但纯度很低（A260/280大概1.5-1.8），硬着头皮PCR了也可以跑出来，但是结果可能不可信。

所以想请教各位大神指点！是否有什么改进的方法！

juyue2010

2022-10-24

有帮助

试剂盒里，裂解液是trizol优化来的，直接更换不太好

土井挞克树

2022-10-24

有帮助

你可以加上纯化步骤之后再试一试。

balalaLy

2022-10-24

有帮助

我们用柱式提取法都是为了能提高浓度，你的浓度低可能是elute的时候没有把RNA完全溶解下来，建议把elute buffer 预热45度左右，可以明显提高RNA的浓度。

Dr_劉医生

2022-10-24

有帮助

柱提RNA可以用Trizol法，纯度低的原因可能还是悬浮细胞上样量不够