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求助:皮肤组织提RNA,难以研磨

相关实验:TRIzol RNA 提取方法

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lovemysh

请问正常人皮肤组织提RNA时,液氮研磨和高通量仪器都不能研磨碎,各位大神有无好的办法?

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5 个回答

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dxy_gwrp7ndq

有帮助

可以组织样品液氮研磨成粉末状,在液氮基本挥发完时,直接在研钵中加 Trizol 试剂继续研磨,由于 Trizol 试剂中含有强烈的 RNA 酶抑制剂,组织样品和 Trizol 充分研磨混匀后能有效抑制 RNA 的降解;再将混合物转移到玻璃匀浆器中进一步匀浆,能使组织中的 RNA 充分释放出来,提高 RNA 产量。在将实验室温度控制在25℃以下的条件下,操作过程尽量在冰盒上操作,避免温度升高加速 RNA 降解。 所有使用的物品和器具用 DEPC 水处理、烘烤,戴口罩并经常更换一次性手套,尽量减少 RNA 酶的污染机会。

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府宅

有帮助

皮肤富含纤维组织和弹性,要从这类组织有效提取RNA是非常困难的。可以使用样本研磨器搭配研磨珠对冷冻的活检皮肤组织进行研磨。

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bamboopiggy

有帮助

这个要用液氮研磨,在研磨过程中,不断的加入液氮,进行研磨

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秋秋欣欣

有帮助

把组织放金属体内,加少量液氮,快速研磨,组织变软后,再加入少量液氮,继续研磨,金属器具提前预冷

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balalaLy

有帮助

提RNA并不需要皮肤组织完全破碎,只要剪碎一点,加trizol都能裂解出RNA

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