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细胞RNA提取时trizol的量是多少?

相关实验:TRIzol RNA 提取方法

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tiramisulydia

细胞RNA提取时trizol的量是多少,是按照细胞个数计算trizol的量吗?我百度了一下有的说是根据培养板的面积计算的,到底怎么衡量?
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3 个回答

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上海欧易

有帮助

(1)针对于贴壁细胞:Trizol 的使用量是由培养皿的表面 积决定,而非由细胞数目决定。通常每 10 cm2培养面积(6 孔板单孔或 35 mm 平皿)加入 1 ml Trizol,用加样器吹打数次,以确保细胞完全裂解,然后转移至离心管中。注:Trizol 量不足可能导致提取的RNA中有DNA污染,多加是没有影响的。
(2)针对于悬浮细胞:Trizol 的使用量由细胞数目决定。通常离心收集细胞,弃尽上清后,每 5-10×106的细胞中加入 1ml Trizol, 用加样器吹打,使其完全裂解,然后转移至离心管中。 注:添加 Trizol 前切勿洗涤细胞,以免 RNA 降解。

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dxy_za0jbge8

有帮助
300μl细胞液+700trizol
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DD_BB

有帮助
trizol是一种RNA释放剂,自身具有保护RNA的活性,个人觉得合理范围内没有上限
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