求助为啥我的taq-man探针荧光强度那么低

朋友们!有没有会taq-man探针法检测的?

俺的相对荧光强度很低，1以下，这正常吗？我看别人实验都上千了！

引物和探针是自己设计的，跑过电泳没有问题，上样的dna浓度大概为10ng/微升，引物和探针的终浓度在0.5微mol/l左右，我现在都怀疑是不是这台机器跑不了探针法了😂