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小鼠骨骼pcr与正常组织pcr的实验步骤的异同之处及注意事项?

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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第一只兔子

丁香园中很少涉及骨相关实验的内容,尤其是关于骨骼PCR及WB的问题,想请教一下各位大佬,骨骼实验与其它软组织实验的区别在哪里:

1.一般会取骨骼的哪部分进行pcr实验(胫骨远端?)

2.骨骼研磨之后,与其他软组织的实验步骤是否有不同之处,或其它需要注意的事情?

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3 个回答

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z流沙z

有帮助

主要就是研磨,其他和正常组织提取RNA一样

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loveliufudan

有帮助

1.一般而言,进行骨骼PCR实验通常选择长骨的远端部位(如胫骨远端)或髋关节附近的骨头。这些位置通常易于取得并包含丰富的骨骼细胞。

2.在骨骼研磨之后,与其他软组织实验步骤的主要区别在于骨骼必须通过一个降解过程将基质和细胞分离出来。这通常需要使用特殊的化学物质来破坏骨骼组织,并利用离心或过滤等方法将细胞分离出来。在进行Western Blotting时,还需要特别注意骨骼样本中可能存在的钙沉积和矿物质的干扰,这可能需要特殊的处理步骤以消除这些干扰因素。

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土井挞克树

有帮助

一般取胫骨远端的骨骼组织,需要多次研磨充分才可以进行下一步

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