qpcr ct值高

有几个可能性。1、最有可能是RNA降解严重。2、逆转可能出问题，可能是逆转试剂有问题，也可能逆转程序没设置好，也可能是逆转前RNA没有预热变性。3、有DNA污染，可能在抽提的时候有DNA混进去了。

有几个可能导致你在qPCR实验中观察到高的CT值:

模板的质量和纯度：确保你使用高质量、纯度的RNA作为模板，使用比260/280比值高于1.8的RNA可以提高实验结果的准确性。如果你的RNA质量不好，会导致你的cDNA合成效率低下，从而导致高的CT值。

反转录的效率：确保你的反转录反应条件是正确的，包括反应时间、反应温度、反应体积、反应物浓度等因素，如果这些条件不适当，将导致反转录效率降低，从而导致高的CT值。

引物的浓度和稀释：确保你的引物浓度和稀释是正确的，如果你的引物浓度太高或者稀释过多，会导致PCR效率降低，从而导致高的CT值。

实验条件和操作：确保你的PCR实验条件和操作是正确的，包括温度、时间、扩增体系、数据分析等因素，如果这些因素不正确，也会导致高的CT值。

另外，你可以考虑更换其他内参基因来验证实验结果。如果你换用其他内参基因的CT值变得更加合理，那么你之前的CT值偏高可能是由于actin基因表达量的变化。

还是稀释浓度没有掌握好，保证RNA浓度及质量。你可以根据前期的pcr估计表达量如何，再调整稀释度