丁香实验_LOGO
登录
提问
提问
我要登录
|免费注册

qpcr内参一定要选择GAPDH嘛

相关实验:反向 PCR (inverse-PCR)

user-title

小木子RYHS

请问qpcr的内参一定要选GAPDH嘛 选择的依据除了文献还有什么别的方法嘛

wx-share
分享

5 个回答

user-title

dxyc42u

有帮助

不一定非要选择GAPDH啊,βactin也是可以的

user-title

loveliufudan

有帮助

在进行实验中,选择哪个基因作为内参可以根据具体实验情况进行选择,GAPDH不是一定要选作内参,其它基因也可以作为内参。

在选择内参时,需要考虑以下几点:

基因的表达稳定性:内参基因应该在实验条件下表达稳定,不受处理和时间的影响。因此,应该在实验前对多个潜在内参基因进行筛选,通过统计学方法确定最适合的内参基因。通常建议使用稳定性高的基因,例如18S rRNA、β-actin、GAPDH、HPRT等。

基因的表达水平:内参基因的表达水平应该与实验中感兴趣的基因相当。如果内参基因的表达水平与感兴趣的基因存在明显差异,则可能会影响结果的准确性。因此,在选择内参基因时,应该考虑内参基因与感兴趣基因的表达水平。

基因的生物学功能:在选择内参基因时,还应该考虑基因的生物学功能。如果内参基因与实验中的生物学过程存在明显相关性,则可以提高结果的准确性。

除了文献和实验经验之外,还可以使用基因表达数据分析工具,如GeNorm、NormFinder等,对多个潜在内参基因进行筛选和评估,以确定最适合的内参基因。

user-title

毛利小五郎的徒弟

有帮助

不是的,一般以actin或者gapdh为内参,内参基因多数都是housekeeping gene

user-title

申东熙老伯

有帮助

不一定选择GAPDH,也可以是β-actin。

user-title

huarenqiang5

有帮助

你可以根据自己的实验目的等方面进行选择,qpcr目前常用的内参基因包括:GAPDH、β-actin、以及18s rRNA等。

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序