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小鼠肾脏中采用RT-PCR,WB测NO相关指标结果与血浆NO浓度趋势不一致,该如何分析?

相关实验:反向 PCR (inverse-PCR)

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正在努力毕业的娃

我刚刚接触分子这一方面。想请教各位老师如下结果该如何分析?

我测了小鼠血浆中NO浓度,通过WB方法测了小鼠肾脏中NO蛋白含量,以及RT-PCR方法测了肾脏中NO mRNA相对表达量。因为模型小鼠有炎症,所以血浆中NO浓度以及肾脏中WB结果都比空白组小鼠高,这是和预期结果相吻合的。

但是肾脏中NO mRNA的相对表达量却比正常组小鼠要低很多,已经有显著性差异了,而且肾脏中eNOS mRNA的表达量也比正常组小鼠低,我想求助一下这个情况怎么分析啊?

谢谢各位老师了!

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3 个回答

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loveliufudan

有帮助

这个情况有几种可能的解释:

这个NOmRNA可能不是编码eNOS蛋白的mRNA,而是其他的与NO有关的mRNA。因此,你需要仔细检查你所测定的mRNA是哪一个。

尽管NO蛋白和mRNA在生物学上都与NO的生物学功能相关,但它们的关系可能非常复杂。例如,NO的生物合成和降解是高度调节的,可能存在不同的机制来调节NO的生成和释放,以及调节eNOS的表达和稳定性。因此,这两个结果可能只是巧合。

由于你使用了模型小鼠,可能存在其他未知的生物学变化。例如,炎症可能导致调节因子的表达发生变化,从而影响NO的生物学功能。因此,你需要进一步研究这些可能的变化,以确定它们是否会影响你的结果。

综上所述,你需要仔细检查你的实验,确认你所测定的mRNA是哪一个,以及其他可能的生物学变化,以确定这些结果的意义和可能的解释。

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huarenqiang5

有帮助

RT-PCR相对而言灵敏度要高,建议以RT-PCR检测结果为主进行对比分析。

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dxyc42u

有帮助

做了三次独立实验都是这种情况吗,如果只是一次就没法分析

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正在努力毕业的娃user-title

对的,重复三次都是这样子的

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