反转录失败，p不出条带，求指教！
大海带
这个是rna的琼脂糖凝胶电泳图，
预变性：oligo dt（1ul)和n6(0.5ul)70℃，10min，4℃，2min
反转录：m-mlv，RRI，10mm dntp，5x mlv buffer
42℃，60min，70，10min
选择实验室用的植物actin的引物，做pcr，30循环，跑胶
前十二个是我的cdna跑胶图，依次是经过不同处理的根茎叶，根茎叶，根茎叶，根茎叶。
为什么根里的rna没有发生降解，但是用它反转录出来的cdna，pcr之后就跑不出来我的actin条带？
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4 个回答
曙光karry
有帮助
1. cdna 梯度稀释3-4个浓度 2换一个反转录的盒子做一下
bamboopiggy
有帮助
是不是经过你的处理后，植物的actin在这里不适合做内参？
dxyc42u
有帮助
第一步有没有迅速降温，去除RNA的二级结构？
土井挞克树
有帮助
有可能是反转录的cdna重复区域太多或者存在二聚体。
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