电激法农杆菌转化，菌落pcr只有微弱条带，摇菌后，第一次没有，第二次也只有微弱条带

考虑还是转化的问题，可以延长转化时间。

要检查一下引物对不对、其次是你的模板够不够、农杆菌中质粒拷贝数很低，可以提出质粒后再来PCR。

考虑没转化成功，试着优化一下转化条件。

那就是没跑出来，最大可能是引物浓度不够，当然扩增的温度也很关键。