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荧光定量pcr的扩增曲线是图片这样是什么原因呀?

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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月岛莹的

请问各位老师,荧光定量的扩增曲线是图片这样的原因是啥呀,熔解曲线单一峰,但是跑了几次都没有扩增曲线,ct值异常的高,都35+,请问应该采取什么措施呀,感谢感谢

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5 个回答

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lanlvmaomao

有帮助

我觉得可以提高一下你的cdna的浓度

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bamboopiggy

有帮助

他们这个小程序不能放大图片,我看不清楚你melt curve的值是多少,一般,如果melt curve起峰不好,就是引物不好,你换个引物试试

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麻黄连翘赤小豆

有帮助

循环不够,都看不到后面的线,可以加到50

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Dr_劉医生

有帮助

检查一下你所用的酶是否为化学修饰的热启动酶,预变性时间至少 5 min,如果是高 GC 的模板,可以延长预变性时间至 10 min,预变性时间不够,会导致酶活未完全释放,酶活释放不好,那扩增效率肯定就不行啦,

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

转换对数处理一下,转换后绘图。

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