藤椒味的大炸鸡
qpcr 内参ct值在15-25左右,但是目的ct值在31左右。怎么解决ct值过高问题,数据是否能用?
bamboopiggy
内参在15-25,目的在31是可以的,但是数据能不能用要看melt curve
毛利小五郎的徒弟
可能原因:
1,内参引物效果不佳:可能原因是引物设计存在问题,比如存在引物二聚体等;另外,也有可能是引物使用时间过久或者保存不当,出现了降解。
2,RNA质量不好,比如260/280, 260/230值偏低;
3,反转时RNA含量过低;我们反转20uL体系一般用1ug RNA;
4,定量时cDNA以及引物含量偏低;
balalaLy
表达量低CT值就低了,主要还是要看溶解曲线
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