qpcr 内参ct值在15-25左右，但是目的ct值在31左右。怎么解决ct值过高问题，数据是否能用？

内参在15-25，目的在31是可以的，但是数据能不能用要看melt curve

可能原因：

1，内参引物效果不佳：可能原因是引物设计存在问题，比如存在引物二聚体等；另外，也有可能是引物使用时间过久或者保存不当，出现了降解。

2，RNA质量不好，比如260/280, 260/230值偏低；

3，反转时RNA含量过低；我们反转20uL体系一般用1ug RNA；

4，定量时cDNA以及引物含量偏低；

表达量低CT值就低了，主要还是要看溶解曲线