求解PCR问题

rrrlkkkk

2022-08-30

各位大佬，处理小白，有个问题咨询一下

我看文献里面有个疑问:

1.将miRNA转染到细胞后，培养细胞然后提取总RNA后，我怎么才能得到miRNA呢，文献里面没写，是用Northern blot找到吗？

2.找到miRNA后，逆转录成cDNA，然后做PCR，最后他得到最终想要的miR-885-5P和CTNNB1 mRNA这两个片段，又是通过什么得到的呢

汤姆卜丽波

2022-08-31

有帮助

总RNA就全包括了，你后面逆转录要用的是你根据你自己的miRNA设计的特异性引物，得出的DNA就已经是你的特定样本了

秋秋欣欣

2022-08-30

有帮助

提取总RNA后用miRNA特定的逆转录引物逆转录就会得到想要的miRNA了

bamboopiggy

2022-08-30

有帮助

1.提取total 的RNA里面也包含了miRNA，所以只要逆转录就行。

2.他得到的miR-885-5p和ctnnb1 mRNA是设计引物，用realtime pcr进行检测的。

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