酿酒酵母酵母菌落pcr

你试试先用大肠验证一下，如果有，再提取质粒转入酵母

你有positive control吗？如果positive control有条带，但是你的目的条带没有，就说明你的克隆都是阴性的。如果你只是蘸取是不行的，要确定体系里有足量的菌，我最近刚做过，发现如果菌少的话也是做不出来的，还有最好在原有预变性温度下增加1分钟，利于细胞裂解，最后电泳检测之前，10000rpm离心五分钟，使菌的裂解碎片完全沉淀，保证电泳是碎片的影响最小，因为有时候电泳菌的碎片会一起随条带前进，感染检测。

和你是否诱变过关系不大，你可以拿一个没有诱变过的作对照，跑一下看看。

可以试试用蜗牛酶提取DNA以后作PCR