PCR温度剃度如何快速摸索出来

一般情况下合理的退火温度约是从55℃到70℃。退火温度的设定一般要比引物的Tm低5℃。实验过程中设置退火温度时应比引物产品说明书标明的退火温度高出1℃~2℃最佳

如果不担心用量的话，可以设置温度梯度去P，P完跑一下胶看看结果。或者直接使用touch downPCR，不管退火温度是多少都能P得出来。

一般跑个梯度pcr，从你primer的上下5度，或者是55-65度，然后找个差不多接近的温度就可以。