qPCR熔解曲线乱，有主峰，但有杂峰，80°C以下90°C以上都有，为什么

相关实验：实时荧光定量 PCR（realtime PCR）

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地包天松鼠

2022-08-14

引物没有问题，试过了。

cDNA应该没有gDNA污染，提RNA的时候用gDNA消化过了。

5 个回答

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爱吃水稻的小呆瓜

2022-08-18

有帮助

建议定量引物先跑一趟琼脂糖电泳看一下条带，如果条带单一明亮，再去跑定量。如果还有很多峰，可能是引物二聚体，建议更换引物试试

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bamboopiggy

2022-08-15

有帮助

你的rna质量如何？感觉虽然有主峰，但是主峰不高。

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dxy_0je5kr6

2022-08-15

有帮助

引物特异性不好吧，建议换引物

模板可能有杂质，不纯

RNA降解或污染

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whilt-shirt

2022-08-15

有帮助

有可能是引物问题，建议重新设计引物

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麻黄连翘赤小豆

2022-08-15

有帮助

你这个可能是退火温度的问题，试一下另一种方案

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