丁香实验_LOGO
登录
提问
提问
我要登录
|免费注册
丁香通

qPCR熔解曲线乱,有主峰,但有杂峰,80°C以下90°C以上都有,为什么

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

user-title

地包天松鼠

引物没有问题,试过了。

cDNA应该没有gDNA污染,提RNA的时候用gDNA消化过了。

wx-share
分享

5 个回答

user-title

爱吃水稻的小呆瓜

有帮助

建议定量引物先跑一趟琼脂糖电泳看一下条带,如果条带单一明亮,再去跑定量。如果还有很多峰,可能是引物二聚体,建议更换引物试试

user-title

bamboopiggy

有帮助

你的rna质量如何?感觉虽然有主峰,但是主峰不高。

user-title

dxy_0je5kr6

有帮助

引物特异性不好吧,建议换引物

模板可能有杂质,不纯

RNA降解或污染

user-title

whilt-shirt

有帮助

有可能是引物问题,建议重新设计引物

user-title

麻黄连翘赤小豆

有帮助

你这个可能是退火温度的问题,试一下另一种方案

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序