bamboopiggy
明显没有扩增出来,你用什么做模板进行扩增的啊?
Eason老歌迷
总是出现弥散的话 可能是在PCR反应体系中一链产物的含量过高,你可以减少引物的用量,减少PCR的循环次数,在用DNase处理被DNA污染的RNA样品时,其产生的寡核苷酸片段会产生非特异性扩增,一般会显示为弥散背景。
天一湖医者
问题应该在PCR的过程,因为没有特异性的产物。
首先可以用taq酶做普通PCR,看是否有产物出现。如果有条带,说明mix 有问题;若没有特异性产物,那么模板和引物可能存在问题。对于模版,可以选个内参;对于引物,请确认序列的特异性,同时可以考虑简并引物。