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在跑完定量PCR后,如何处理相对定量数据?

相关实验:定量PCR技术

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你好几和户

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3 个回答

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天一湖医者

有帮助
公式: R=(1+E1)^△Ct1(Control-Sample)/(1+E2)^△Ct2(Control-Sample)

其中,E1:目的基因引物扩增效率;E2:内参基因引物扩增效率;△Ct1:实验组目的基因Ct值差;△Ct2:对照组目的基因Ct值差。 你观察这个公式时候就发现,当扩增效率E为1(即100%)时,该公式就等于2^-△△Ct,这就是为什么会有2^-△△Ct方法的原因!
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Eason老歌迷

有帮助

qPCR的数据相对定量分析其实很简单。分享一下自己的经验,最常用,最普遍的相对定量方法就是2^-△△Ct法,该法最最简单的说就是:首先将一次实验的所有基因Ct值整理好,之后用每一组样本自身的目的基因Ct值减去自身内参基因Ct值,得到的数就是△Ct;换成公式就是:△Ct=Ct(目的基因)-Ct(内参基因);然后,将每一组样本每一个目的基因的△Ct都算好,整理进Excel,用本次实验中待研究样本的△Ct减去对照组样本的△Ct,并同时对所有结果取相反数(就是加一个负运算,正数就变成负数,负数就变成正数),该步运算得到的结果就是-△△Ct。最后,对-△△Ct进行2的幂运算,即2^-△△Ct就得出Fold Change。

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balalaLy

有帮助

按照公式计算2的-▲▲CT次方,每个组都除以对照组,得到以对照组为1的相对值

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