人群PCR

1. 计算每个样本每个基因对应的Ct均值（每个组、每个样本、每个基因的复孔Ct均值）。

2. （每个组、每个样本、靶标分子的 Ct 值）减去（同一个样本内参分子的Ct值），得到每个组每个样本靶标分子的∆Ct值。

3. 单独计算（上一步）对照组所有样本中靶标分子的∆Ct算术均值。

4. （每个组每个样本靶标分子的∆Ct值）（第二步）减去（对照组所有样本中靶标分子的∆Ct 均值）（第三步），得到每个组每个样本靶标分子的∆∆Ct值。

5. 由第4步得到的每个组每个样本靶标分子的ΔΔCt 值，经过2^-ΔΔCt计算，最终得到靶标分子在每个组每个样本对应的相对表达量。

基本原理是用最小二乘法求。先将数据按大小排序，计算相邻数据之间的标准差。如果需要分组后，各组平均数，平均数之间数据方差最小（各组数据的平均值尽量相等），可以采用首尾截取分组的办法。如果需要使得每个分组中的数据，方差最小，可以设置一个初始的方差上限值，然后将相邻数据分成几组（满足方差小于这个上限），不断迭代，获得最优值。

先均一化数据，去除误差，然后在计算