请问pcr序列是这样的下一步怎么办

再严谨操作加一次样测一次，还是这样就要换引物

绿色曲线的melt curve是可以的，但是估计是你的内参，另外一个引物的melt curve不行，确实是太宽了，你还是要重新设计，pcr以后的产物可以跑胶鉴定，不需要送测序。

这还是重新设计引物的，对比好序列，特异性尽量高一点