加尾法逆转录miRNA的qPCR如何区分前体和成熟体？

前体和成熟体的大小序列都不一样。除非你特别设计不同引物，不会一起扩增

加尾法的思路则是先对miRNA进行加PolyA尾处理,改造成mRNA的结构,再采用mRNA常用的oligo (dT)反转录引物进行反转录,从而得到较长的模板链。

只要是你的引物不同，那么就可以轻松区别开

你逆转的时候，用的方法一样，但是你跑qpcr的时候，用到引物不一样啊，可以区分成熟体和前体的

利用TaqMan实时分析，设计两套不同的引物组和探针来检测前体和成熟microRNA。对于成熟的microRNA，可以使用茎环结构的引物，对于前体，可以使用常规的引物，因为序列很长。