PCR实验中菌落PCR检测有条带，接种大摇后无条带

一般菌落pcr，可能会存在插入片段也转入菌种，但是没有和载体连接成功。所以一般做完菌落pcr以后，先要送测序，测序成功，才大摇比较合适。

1，先排除质粒提取试剂盒的问题，或操作的问题

2，还有可能是发生了重组，重组进了基因组，所以能p出来，需要用rec重组缺陷的菌株

3，考虑质粒的拷贝数

4，通常很重要的也是很常发生的就是杂菌污染，所以质粒的相对浓度不足以检测到

菌落pcr假阳性概率高，你重新拿菌落和菌液为模板进行PCR检测，如果还是这样啊，可能是平板上连接液中的未连接载体的扩增引起的目的条带，进一步质粒PCR检测，可证明目的片段是不是连上了