PCR实验中如何清除污染？

气溶胶污染很难清除，最简单有效的方法，换地点，换衣服，换移液器，换pcr相关所有试剂，没必要筛查具体什么试剂受到了污染。

严格遵守操作规范，所有液体开盖前离心。最后一步再开模板管

设计阴性对照组，根据阴性对照确认污染情况。可使用敞开后隔夜放置操作区的阴性对照进行实验（在单独的实验室验证），若连续三天阴性对照没有起跳，则说明污染得到控制，可恢复正常实验。当然，为最大程度的降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现，在实验室前期设计及日常实验室管理和操作中，就需要进行合理的规划以及严格执行实验室SOP，把污染的可能性扼杀在摇篮中。

注意上样的时候及时更换枪头，防止样品污染。

操作环境避免人员走动

耗材要灭酶的，

操作者戴口罩，少说话，换新手套

PCR实验过程中易发生污染产生污染主要有以下4个原因：

1、是PCR扩增产物的污染。这也是见的污染原因。PCR产物经反复多次的扩增，其复制量远远超过PCR的检测极限，所以即使是极微量的污染也足以造成实验结果假阳性。

2、试剂的污染。在试剂的配制过程中，接触了污染的容器、移液器、枪头、溶液等物导致试剂被污染。

3、待测样品被污染。放置样品的容器被污染或由于容器密封不严导致样品与外界接触被污染;其次在核酸提取过程中使用了被污染的移液器或枪头导致样品被污染;另外，某些样品中含毒，若弥散到空气中则有可能形成交叉污染。

4、气溶胶污染。若气溶胶中包含病毒等污染物扩散至空气中极有可能造成PCR产物污染。气溶胶是由空气与液体表面摩擦而产生的，开盖、晃动反应管及污染加样器的反复吸样都可形成气溶胶从而导致交叉污染。据计算一个气溶胶颗粒可含48 000 拷贝，因此，应尤其重视由气溶胶导致污染的问题。PCR 实验室只要出现了污染，之前的结果报告就变为无效而且也无法进行其他的实验操作。必须找出并彻底清除污染源，才能得到准确有效的实验结果。