pcr预变性的98度和96度有什么差别？以及2步法和三步法有什么区别呢

预变性的温度取决于你用的酶的要求，一定要看说明书。2步法是因为你的annealing temperature比较高，和extension temperature 接近，就可以用两步法。

一般来说差别不大。模板小一般用96，要是基因组就用98.还和时间有关。温度高，变性时间可以短一点.

预变性温度要根据DNA聚合酶的特性和模板的GC含量来调整

1、步骤不同：两步法退火和延伸同时在60℃-65℃间进行，以减少一次升降温过程，而三步法则分两次完成。

2、用时不同：两步法减少一次升降温过程，提高了反应速度，用时较短。而三步法则比两步法用时更长。

3、适用条件不同：两步法中，PCR扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成。三步法的PCR扩增区则较长，需要降低系统温度，引物与DNA模板结合，形成局部双链。

1、通常预变性温度为94 ℃-98 ℃,反应时间一般1-10 min。根据DNA聚合酶不同选择适合的预变性温度及反应时间是PCR反应顺利进行的关键,充分的预变性有利于DNA双链的打开。

98度和96度一般来说差别不大。模板小一般用96，要是基因组就用98.还和时间有关。温度高，变性时间可以短一点.

2、两步法和三步法的区别

1、步骤不同：两步法退火和延伸同时在60℃-65℃间进行，以减少一次升降温过程，而三步法则分两次完成。

2、用时不同：两步法减少一次升降温过程，提高了反应速度，用时较短。而三步法则比两步法用时更长。
3、适用条件不同：两步法中，PCR扩增区很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成。三步法的PCR扩增区则较长，需要降低系统温度，引物与DNA模板结合，形成局部双链。