pcr阴性对照有条带，目的基因无条带
一枝七叶
鉴定菌种做了16srDNA的pcr，体系是预混匀分装的，最后再加入目的基因，试过直接加菌液试过加裂解菌液也试过加提取的基因组，也调过模板浓度，体系全是新拆封的试剂，用到的耗材也全是刚灭过菌的，超净台也用紫外照了半个小时。但就是p不出来，程序p其他的菌没问题，我p其他的菌也没问题，就这一波筛出来的十几个菌，怎么都p不出来，一个条带都没有，反而阴性对照里p出来了。当年百思不解，菌落形态看着是细菌啊，18s好像也做过一次，也没p出来
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3 个回答
天一湖医者
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这种情况，升高退火至65度，甚至在68度做两步法PCR，或者是将循环数降低，阴性对照可能就没有扩增了。不过这样灵敏度会降低很多，应该不符合lz检测的初衷，建议更换靶基因。
bamboopiggy
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如果16 和18 都没有p出来，大概率是你的菌种有问题，实在不行换了吧。
汤姆卜丽波
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操作过程没问题的话，你看看是不是试剂有污染？
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