为什么我用QPCR测端粒长度时阴性对照总是出现CT值？而且该CT值和加DNA后的CT相差并不大？

主要看你的CT值大约是多少，如果很大（大于40循环）那么可以判定结果没有问题，如果跟目的基因的CT一致或者为其他CT值那么判断为模板造成的气溶胶污染或者其他外缘DNA造成的污染。另外你阴性对照加的是水，那么说明你做梯度稀释的时候用的也是灭菌水，这个做荧光定量试验是很不规范的，建议用专门的荧光定量稀释液去做。

当出现这种阴性对照有CT值，也能分为两种情况去考虑：

（1）通过观察融解曲线，NTC 与目的基因融解曲线峰形不重叠。一般 NTC 的 Tm 值较目的基因 Tm 值小。这种情况下，NTC 的Ct值是由引物二聚体造成的，并不影响目的基因 Ct 值的采集。

（2）NTC与目的基因融解曲线峰形重叠。NTC的Tm值等于目的基因的Tm值。

出现ct值，可能是引物的二聚体，也可能是你的水就污染了，所以换谁做都一样，最好是重新开封所有试剂