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RNAi用于检验,可行吗?

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丁香实验

RNAi目前强调得做多的一是作为基因治疗的一种策略,干扰致病基因的表达.还有就是作为基因研究的工具,研究某些基因的功能.对于其诊断疾病的功能,似乎还没有听说过. 然而,RNAi是有特异性的,能不能利用其能特异性沉默靶基因的特点,用于临床诊断呢,RNAi能不能成为继PCR之后,实验室诊断的又一把利器呢?欢迎大家讨论.
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3 个回答

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hzdlj

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上几周开会的时候听见了中山二院的宋尔卫研究员讲的RNAi干扰技术,加上我一直很感兴趣,也在看一些文献.会上,我请教过他这个问题,宋老师说他还没有想过这个问题(宋老师很谦虚,听他的讲座受益非浅),不过他向我说起了一个实验模型,就是把siRNA固定在一个固相载体上,然后加入肿瘤细胞,当然siRNA是针对肿瘤细胞的耐药基因设计的,培养细胞加入化疗药物,观察哪些细胞成活了,成活了的,显然不携带耐药基因,没有成活的当然是携带了耐药基因的,成活了的就没有携带. 个人感觉,RNAi从原理上说在检验中应该还是有用武之地,不过还得需要不断摸索,还有很多关键环节要解决.我的初步构想是用于细菌的鉴定,把siRNA固定在固相载体上,或者放在液相溶液中,然后培养细菌,siRNA针对的靶基因必须是针对能引起细菌生物学行为改变的靶基因,通过观察细菌的生物学行为判断是否细菌携带了靶基因,进而对细菌进行鉴定,但是目前要解决的问题太多,比如对靶基因的选择,用适当的方法筛选阳性菌落等.有点和基因重组类似,需要不断摸索. 还有就是可以用于肿瘤的诊断,尤其是血液系统的肿瘤,原理与细菌相同,肿瘤细胞肯定都有自己的生物学特性,通过判断特定的siRNA能否干扰细胞的生物学行为鉴别对肿瘤细胞进行分类,进而对肿瘤细胞进行组织学分类(说不定以后肿瘤就有RNAi分类了).要解决的问题也很多,首先要对肿瘤的发生,发展的分子机制十分了解,这样才能选择恰当的靶基因,这估计没有十年八年是不太可能的.其次就是对细胞的阳性克隆进行筛选,建立有效的筛选方法.总之,问题太多了,不过一旦成功,意义就很大了,因为不仅能诊断肿瘤的类型,更重要的是为肿瘤的治疗提供了很多线索,对于临床指定治疗策略有很大帮助(肿瘤以后可能都是基因治疗了). 呵呵,狂妄了点,有点异想天开,欢迎大家讨论.
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我是老大

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我感觉这项技术的成本还是太昂贵,成本不降下来不容易推广,而且对实验室的要求及对操作人员的要求比较高。楼上的想法是非常值得考虑的但是对于肿瘤的诊断我自己感觉前景还不是很光明,这项技术还是比较适合于一些致病基因较明确的疾病。
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liyil3

有帮助
RNAi用于微生物并不是异想天开。上次我和我师弟陪同一位“多利”实验室回来的老师吃饭,他就给我们提出了这个建议,而且和我师弟的课题还能有一定结合。估计搞好了有很好的前景。建议楼主可以考虑进行一下研究。 没有做不到,只有想不到。
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