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简介
来源:丁香实验
操作方法
一、RNA 提取方法 1: 从组织培养物中提取 RNA1. 如果细胞贴在瓶壁或平板上,则倒掉培养基,将平板置于冰上。2. 如果细胞是悬浮的,旋转离下细胞,并除去培养基。3. 用 10~20 ml 的冷磷酸盐缓冲液(PBS) 漂洗细胞。4. 倒掉 PBS,并用 1000ul 移液器吸去残留的 PBS。5. 每 100~150 mm 平板加入 2 ml 苯酚-胍盐单相溶液(RNApure),以裂解细胞
🔥 PCR 纯化回收1.在紫外投射仪或凝胶成像仪上,用刀片切取包含目的条带的琼脂糖凝胶并称重;2.一般以 0.1g 胶加入 100μl 溶胶液的比例(具体根据试剂盒说明添加),按凝胶实际重量加入溶胶液,水浴锅中 55℃ 溶胶(期间可缓慢震动 Ep 管,将胶溶解完全);3.回收试剂盒中会配有回收柱和废液管,将溶解好的溶液加入回收柱中,并将回收柱套入 2ml 废液管中;4. 12000 r/min 离心 30-60s,去