RNA提取的时总出现双峰该怎么办？

new杀杀杀

2018-12-04

首先非常感谢师兄师姐们对我问题的解答，由于程序的局限不能回复你们进行讨论，所以就再开一个话题，感谢大家的解答，问题如下： 1.使用NanoDrop2000仪器进行测量RNA的conc和260/280值时，曲线出现双峰，这说明了什么？可用吗？ 2.用上述的RNA进行逆转录合成cDNA（所用试剂为TaKaRa），然后进行NanoDrop2000测量，conc为1050～1400左右，曲线为单峰，这说明了什么？可用吗？

1 个回答

极客医生

2018-12-04

有帮助

双峰，不知是哪种样子的双峰（左右？上下？），如果是左右可能浓度太低吧，而且不是很纯，导致230值比较高。如果是上下，emmmm，你是不是选了两个值？ 2）逆转录以后不用测浓度，很好奇你为什么测浓度。举个例子，你把反应完的PCR产物拿去测浓度，无论你的目的基因有没有扩增出来，NanoDrop测出来的浓度都是一样的，也就是说，测浓度是没用的，同理，反转录以后测浓度也没有用。一般是反转录前算好RNA浓度，如果是不同样品，不同浓度RNA，反转录时加入等量RNA就可以了，默认反转出来的cDNA也是一样的。