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国产荧光微球标记抗体稳定性下降

相关实验:荧光原位杂交实验

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麻汁现磨现卖

荧光微球标记稳定性下降

具体是这么个情况,之前一直用进口球,标记固相之后稳定性没问题;后来为了降成本换了国产微球,相同标记方法固相之后稳定性不好,55度破坏一天信号就下降明显,后来一直再调各种ph、离子浓度、活化剂用量及比例,微球与蛋白的比例,均未有明显效果。

我们其他实验室也有微球标记,后来让人家用同样的球和抗体给我们标记了一个,稳定性55度破坏很稳定,炸了啊,据说还是直接一步法标记的,还不好去问,纯纯让人家逼死了啊。

有大佬了解这方面的帮忙解决一下吗。非常感谢  

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1 个回答

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dxy_mqg1dtg8

有帮助

荧光微球标记稳定性下降可能有以下几个原因:

1. 微球质量差:国产微球的质量可能不如进口微球,导致微球的表面粗糙度不一,比表面积不同,固相效果差,导致标记的蛋白易于脱落。

2. 微球与蛋白的比例不合适:微球与蛋白的比例不合适可能会导致蛋白在微球表面的分布不均匀,部分蛋白可能会溶解或脱落,导致标记的稳定性降低。

3. 固相方法不当:固相方法可能不够完美,导致蛋白没有均匀地附着在微球表面上,或者蛋白分布不均匀,易于脱落。

4. 条件变化:可能是固相条件变化,比如温度、离子浓度、pH等,导致标记的稳定性下降。

为了解决这个问题,建议可以尝试以下几种方法:

1. 更换国产微球:尝试更换不同品牌或型号的国产微球,找到适合的微球。

2. 调整微球与蛋白的比例:尝试不同比例的微球与蛋白混合,找到最佳比例。

3. 优化固相方法:尝试不同的固相方法,比如改变固相时间、温度、pH、离子浓度等。

4. 控制固相条件的稳定性:固定固相条件,尽量避免条件的变化导致标记的稳定性下降。

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