感受态效率上不去和那些原因有关呢？

①菌液OD值偏大或偏小②原始菌株不好③试剂超纯程度不够④操作时，对菌体伤害过大。影响感受态效率的最重要的因素就是:菌的状态。

当感受态效率无法提高时，可能与以下几个因素有关：

1. 克隆选择：在克隆过程中，不同的细胞可能具有不同的表达水平和生长特性。如果你选择的克隆具有较低的感受态表达水平或生长较差，那么整体的感受态效率可能会受到影响。在选择克隆时，建议进行细胞的初步筛选和评估，选择表达水平较高且生长良好的克隆。

2. 转染效率：感受态效率的提高也依赖于成功将外源基因导入目标细胞中。转染方法的选择、转染试剂的质量和浓度、转染时间和条件等因素都可能对转染效率产生影响。确保使用最适合你的细胞类型的转染方法，并优化转染条件以提高转染效率。

3. 信号通路和调控因子：感受态表达的效率可能受到信号通路和调控因子的影响。一些细胞可能对外源基因的表达具有特定的调控机制或信号通路限制。在一些情况下，修改信号通路或调控因子可能有助于提高感受态效率。这可能需要进一步的研究和了解目标细胞类型的特性。

4. 缺失或变异基因：某些细胞可能缺失或发生基因变异，这些基因在感受态表达中起重要作用。如果你的目标细胞存在这样的基因缺失或变异，那么感受态效率可能会受到影响。在进行感受态表达之前，对目标细胞进行基因分析或评估，可以帮助你了解潜在的基因缺失或变异情况。

5. 细胞状态和培养条件：细胞状态和培养条件也会对感受态效率产生影响。细胞的健康状态、培养基的成分和质量、细胞的密度和培养时间等因素都可能影响感受态效率。优化细胞培养条件，确保细胞处于最佳状态，有助于提高感受态效率。

总之，感受态效率的提高是一个多方面因素综合影响的过程。细致地评估和优化每个步骤，了解目标细胞特性，优化培养条件，并进行实验设计的合理性，都可以有助于提高感受态效率。

1．细菌的生长状态：实验中应密切注视细菌的生长状态和密度,尽量使用对数生长期的细胞（一般通过检测OD600来控制.DH5α菌株 OD600为 0.5 时细胞密度是 5 × 107/ml ）；
2．所有操作均应在无菌条件和冰上进行；
3．经 CaCl2处理的细胞,在低温条件下,一定的时间内转化率随时间的推移而增加, 24小时达到最高,之后转化率再下降（这是由于总的活菌数随时间延长而减少造成的）；