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基因克隆:高效感受态细胞制作

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

高效感受态细胞可用于质粒的转化。

DNA的克隆是指在体外将含有目的基因或其它有意义的DNA片段同能够自我复制的载体DNA连接,然后将其转入宿主细胞或受体生物进行表达或进一步研究的分子操作的过程,因此DNA克隆又称分子克隆,基因操作或重组DNA技术。DNA克隆涉及一系列的分子生物学技术,如目的DNA片段的获得、载体的选择、各种工具酶的选用、体外重组、导入宿主细胞技术和重组子筛选技术等。

来源:丁香实验

操作方法

高效感受态细胞制作

一、LB培养基配制(固体培养基加2%琼脂粉)酵母粉Yeast Extract 5g蛋白胨Peptone/g 10gNaCl 10g水 1000ml二、TFBI溶液配制RbCl(氯化铷) 5 g1 M KAc(醋酸钾) 12.3 ml1 M CaCl2(氯化钙) 4.1 ml1 MMnCl2(氯化锰

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