插入碱基

构载体，在基因前面插入两个碱基，但是总是插不进去怎么回事，用的全质粒pcr和片段pcr，同源重组法，每次，基因都能插进去，但是基因前面再插两个碱基测序，有基因，但是没有那两个碱基。