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质粒提取

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

从细菌中提纯质粒DNA

原理

强碱性条件下,质粒DNA和基因组DNA同时从细胞中释放出来,并发生变性。在pH中性,并有高盐浓度存在的条件下,质粒DNA会迅速发生复性,仍为可溶性状态,染色体DNA之间交联形成不溶性网状结构,在去垢剂SDS作用下,染色体DNA与变性蛋白质和细胞碎片结合形成沉淀,通过高心去除沉淀后,再用酚氯仿抽提进一步纯化质粒 DNA,用异丙醇或乙醇沉淀可将之纯化出来。

应用

质粒提取

来源:丁香实验

操作方法

碱裂解法(质粒提取)

(一)细菌培养物的生长;(二)细菌的收获和裂解;( 三) 质粒DNA 的纯化

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