单细胞转录测序问题求助？

单细胞转录组测序需要高质量的细胞核悬液才能得到可靠的结果。以下是一些具体要求和质控步骤：

细胞核悬液的纯度要高：细胞核悬液中含有其他细胞成分或杂质会影响转录组测序的准确性。因此，在准备细胞核悬液时，应当尽量避免携带细胞质等其他成分。

细胞核悬液的完整性要好：细胞核悬液的完整性对于单细胞转录组测序来说非常重要。破损的细胞核会导致RNA的降解，从而影响测序结果的准确性。因此，在准备细胞核悬液时，应当尽量避免使用过度消化或过度刺激的细胞。

RNA的质量要好：对于单细胞转录组测序，RNA的质量也非常重要。RNA的降解或质量不佳会导致测序结果的偏差或错误。因此，应该在制备细胞核悬液之前检查RNA的质量，例如使用琼脂糖凝胶电泳或生化分析仪等方法。

选择合适的细胞：不同类型的细胞可能会对细胞核悬液的质量产生影响。例如，血液中的红细胞可能会释放出大量的RNA，影响转录组测序结果的准确性。因此，在选择细胞时，应该尽可能选择纯化程度高、样本来源单一的细胞。

为保证后续单细胞实验的顺利进行，需要对细胞悬液进行严格质控。为保证单细胞样品活性，建议用新鲜组织制备单细胞悬液，如果取样后无法立即进行试验，可将组织保存在组织保存液中（MACS Tissue Storage Solution），4℃保存，48小时内进行消化。

质控参数：

细胞活率＞90%；

细胞结团率＜5%；

活细胞浓度范围: 300-600 cells/μl

细胞直径范围: 5-50μm；

有核率＞70%。