外周血样本进行单细胞测序，如何保持样本活性最大，取样过程应注意什么？

进行单细胞测序需要采集外周血细胞样本，并且在样本采集和处理过程中，保持细胞活性和完整性是非常重要的。以下是一些关于如何保持样本活性最大和取样过程应注意的建议：

1.采集新鲜样本：尽可能采集新鲜的血液样本，避免长时间存放或运输，这会降低细胞的活性和完整性。

2.使用无菌技术：在取样和处理样本的过程中，应该使用无菌技术，避免任何细菌或病毒污染样本。

3.使用合适的抗凝剂：血液样本在采集后需要立即加入合适的抗凝剂，如EDTA或肝素，以防止血液凝固，维持细胞的完整性。

4.保持低温：在取样和运输过程中，应该保持样本的低温，以防止细胞失活。一般建议在4℃以下保存样本，并在24小时内处理。

5.快速处理样本：在样本采集后，应该尽快进行单细胞分离和测序处理，以最大限度地保持细胞的活性和完整性。

6.注意离心速度和时间：在进行单细胞分离时，应该注意离心速度和时间，以防止细胞损伤或失活。

取样过程应注意：

1.采集管抗凝剂：EDTA

2. 按照外周血标准采集操作进行，取受检者（成人）不低于5 mL外周血，分装2管；取受检者（婴幼儿）不低于2mL外周血；完毕后，充分颠倒混匀，避免凝固。

3. 采集后如即刻寄送，可常温运输（需保证2 天内送达实验室）；如有条件建议冰袋/干冰运输，以避免细胞死亡降解。新鲜外周血寄送前可短期保存在4℃或-20℃，长期应保存于-80℃。冻存的外周血，需在-20℃保存，保存时间不超过2年，反复冻融不超过5 次，需冰袋/干冰运输。

针对于外周血样本，在取样过程中应注意：①外周血（全血）样本取样时需置于EDTA抗凝管中；

②采血管无破损，血液离体后不超过48h，EDTA 抗凝管没有过期，全血体积≥5mL，样本无严重溶血、无血凝块；

③在样本量充足的情况下，可以多设置1-2组重复；

④在寄送装有血液的抗凝管时，需用泡沫包裹，保证4℃左右的低温环境；⑤2-8℃条件下暂存及运输。