passsss
最近在做荧光免疫层析,在湿法摸索的条件下,阴性的荧光值能控制在2000以内,转为干法阴性的荧光值就很高,要考虑如何降低干法的非特异性呀?
毛利小五郎的徒弟
因为干法对抗体的特异度要求更高,建议更换抗体,更换特异度高的抗体就可以了。
loveliufudan
建议考虑以下措施来降低干法的非特异性:
优化洗涤步骤:在洗涤缓冲液中加入一定量的表面活性剂,如Tween-20或NP-40,可以帮助清除非特异性结合的物质,降低背景荧光信号。
加入防污染剂:将一定量的防污染剂(如BSA或casein)加入干法试剂中,可以降低试剂对背景的非特异性结合。
优化反应条件:对于干法试剂,可以调整反应温度和反应时间来优化试剂的特异性和灵敏性。
减少样品中非特异性结合:优化样品预处理步骤,如加入一定量的防污染剂或选择适当的淀粉酸、牛血清白蛋白等胶体阻滞剂,可以降低样品中的非特异性结合。
同时,在使用荧光免疫层析进行实验时,注意正确的操作方法,以及保持反应环境的稳定和一致,也是获得准确结果的重要因素。
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