相关实验:DNA 序列分析技术
能唱歌的车厘子
2022-12-14
图1里cDNA是3倍稀释的,溶解曲线很好;图2的cDNA是2倍稀释,后面出现了杂峰。有大佬们指点下么?
huarenqiang5
2022-12-15
可能原因是:
1、引物设计不够优化
2、引物浓度不佳
3、镁离子浓度过高
4、模板有基因组的污染
毛利小五郎的徒弟
二倍稀释后出现双峰是正常的可以重复三次实验,如果都是同一结果那么就可以用。
juyue2010
可能是cDNA中含有的反转录成分太高,对qPCR造成影响
Dr_劉医生
这是正常的,cDNA的稀释浓度不同,基因扩增的循环次数不同,成指数级增长,所以当3倍变成2倍,达到引物模板ct值就快,循环次数就会少,导致出现杂峰。
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