细菌发酵液短链脂肪酸的测定

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短链脂肪酸的测定的方法有很多，比如说气相色谱(gc-fid)、气质联用(gc-ms)，液质联用(lc-ms)等方法等等。

取样，利用pbs缓冲液对样本进行均质提取，获得均质样本；加入检测溶液，将提取的均质样本置入离心管中，并加入短链脂肪酸前处理溶液；离心，将离心管中带有均质样本的软链脂肪酸前置处理液进行冷冻，接着解冻后对其进行离心并静置，获得上方的清液；过滤，对获得的清液进行过滤后，利用检测平台对过滤后的清液进行测定，获得检测结果。

1用气相色谱法进行检测

短链脂肪酸中含有羧基，其极性较大，可与气相色谱柱产生吸附作用，从而可影响色谱柱的重现性。因此，在用气相色谱法对短链脂肪酸进行检测前，需先对其进行衍生化。气相色谱中常见的衍生化试剂有 BF3- 甲醇、五氟苄基、苄基溴、N-（叔丁基二甲基硅烷基）-N- 甲基三氟乙酰胺及 1-（叔丁基二甲基硅烷基）咪唑等。进行气相色谱检测常用的检测器为氢离子火焰检测器，但由于待检的生物样品中短链脂肪酸的含量较低，故使用串联质谱可显著提高检测器的检测能力。

2用高效液相色谱法进行检测

先将其衍生化，再对其进行检测。常用的紫外衍生试剂有苄基、对硝基苄基、对 -甲硫代苄基、苯甲酰甲基、对 - 溴苯甲酰甲基及对 - 苯偶氮苯甲酰甲基等。

3用毛细管电泳法进行检测

用毛细管电泳 - 紫外和毛细管电泳 - 荧光对生物样品中短链脂肪酸的含量进行检测。毛细管电泳中常见的衍生化试剂有 4- 氨基荧光素、5- 溴甲基荧光素、4-巯基 -7- 甲巯基 -2，1，3- 苯并氧二唑、7-（N，N- 二甲氨基磺酰）-4-N-（4-N- 氨基乙基）哌嗪 -2，1，3- 苯并氧二唑等。

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