激光扫描共聚焦显微镜的操作方法

激光扫描共聚焦显微镜的操作方法如下：

打开电脑，运行ZEN软件。点击“start system”，等待硬件自检结束。

点击“acquisition”，选择“standby”，等待激光器预热。等“status”显示ready后开启激光器。

双手握紧物镜上部，轻轻缓慢抬起镜头。把物镜调为63X Oil（细胞），40X Oil（组织）。

把油滴一滴到目镜上。看两个样品加一滴油，如果脏了要用清洗液清洗，并擦干净。

将小皿（不盖盖子）或载玻片（盖玻片朝下）放置到载物台上，卡紧，放下镜头，并把舱门关闭。

在“Acquire”菜单栏的“Acquisition”中选择扫描模式（“Acquisition Mode”），默认模式为xyz扫描，是最常用的扫描模式，可用于xy扫描和z轴层切（xyz扫描）。还可按样品扫描需要在下拉菜单中选择由x、y、z、t（时间）以及λ（波长）组合而成的多维扫描模式，如xzy、xyt、xyλ、xyzt、xyzλ、xyzλt等。

在“Acquire”菜单栏的“Acquisition”中设置扫描参数，包括分辨率、扫描速度、针孔大小、线平均、面平均、累加及放大倍数等。

预览图像并优化参数。点击“Live”以设定的扫描参数预览图像，图像将显示在右侧的显示屏上。调节z轴位置找到最适合观察的焦平面，并调节PMT的电压及偏移，或激光输出功率使图像达到最佳。可通过控制面板上相应旋钮调节以上参数。

按照上述步骤操作后，就可以开始进行激光扫描共聚焦显微镜的观察了。