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氯胺T法标记蛋白质/多肽注意事项

 (1)放射性碘源的选用:无载体的131 I或125 I均可用于碘化标记,但应尽量选用新鲜的、比放射强度高的、含还原剂量少的放射性碘源。碘源的比放射强度最好≥50~100mCi/ml,至少也要>30mCi/ml,否则加入碘源的容量要增加,随着带入碘源中含有的还原剂(为放射性碘源运输保存所需加入)量也增加,这将会显著降低碘利用率及标记蛋白比放射强度。放置较久和放射性碘源,一方面因衰变致比放射强度降低,另一方面因水的辐射化学产物增多(主要是131 I源),都会降低标记时的碘利用率。放射性碘源含还原剂(如Na2 S2 O5 等)量多时,会抵消氯胺T的作用,降低碘利用率,甚至导致标记完全失败。放射性碘源要用无载体的,标记所用全部用具和试剂必须不含碘;只要有极少量的碘的污染,非放射性碘就会稀释放射性碘,使放射性碘利用率显著降低。为了便于放射性防护和除污染,以及减少射线对蛋白质分子的损伤,标记投入的放射碘量不宜过大,一般以<5mCi为宜。   (2)放射性碘与多肽、蛋白质用量的比例:这比例对标记结果的影响很大。如上述原因,一般标记时放射性投入量不宜过多,示踪实验室中常规每次只

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酶活性测定条件的选择和限定

仅在一定条件下酶反应速度v才和酶量成正比例。一定条件是什么?这些条件之间有无主次关系?如何选择合适的测定条件?这些都是实验室工作者在设计或选择测酶活性浓度方法时必须面对的问题。   首先可从理论上探讨在什么特定情况下的反应速度才可能与酶量成正比例。酶的整个反应过程可简化如下:   式中Kp可看成为ES的解离常数.Michaclis和Menten通过推导可得出下式方程式   此式中V为最大反应速度,对一定浓度的酶而言为一常数。Km为实验室工作所熟系的米氏常数。上式也可改写为:   Kp和Km虽为常数,但[S]为变量,因此 在一般情况下不可能为常数,即v≠k[E],从理论上很清楚说明反应速度v和酶量E之间在绝大多数条件下只存正比,即v∝[E]。而非正比例关系。但在底物[S]浓度很大,远远超过Km的特殊条件下Km值由于相对很小可忽略不计。此式可变为:   由于底物[S]浓度很大,使酶饱和。ES已达极限,反应速度不再增加,故此时反应速度为最大反应V。即从理论上说只有测定的是酶最大反应V。此时反应速度才和酶量E成正比例。也只有在此基础上建立起来的

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常用生化试剂

>>>常用生化试剂 货号 品 名 规 格 价 格(元) 备 注 B1005 Acridine Orange,1/2 ZnCI2 (吖啶橙) 5g/10g 190/320 Sigma分装 B1006 Acrylamide (电泳级丙烯酰胺) 100g/500g 120/500 Sigma分装 B1007 Acrylamide,Ultra Pure 丙烯酰胺(超纯) 100g/200g 140/260 Amresco分装

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常用的色谱分离方法

在生物大分子纯化分析特别是蛋白质纯化分析中,色谱是非常重要而且常用的一种技术。 一、凝胶过滤   凝胶过滤又叫分子筛色谱,其原因是凝胶具有网状结构,小分子物质能进入其内部,而大分子物质却被排除在外部。当一混合溶液通过凝胶过滤色谱柱时,溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。 二、离子交换色谱   离子交换色谱是在以离子交换剂为固定相,液体为流动相的系统中进行的。离子交换剂是由基质、电荷基团和反离子构成的。离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行,或借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。 三、吸附色谱   1、 吸附柱色谱   吸附柱色谱是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种色谱方法。 2、 薄层色谱   薄层色谱是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相,以液体为流动相的一种色谱方法。这种色谱方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层,然后按纸色谱操作进行展层。 3、 聚酰胺薄膜色谱   聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物

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大鼠单胺氧化酶 (MAO)酶联免疫分析(ELISA)

大鼠 单胺氧化酶 (MAO) 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中单胺氧化酶 (MAO) 的 活性。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 大鼠单胺氧化酶 (MAO) 水平。用纯化的 大鼠单胺氧化酶 (MAO) 抗体 包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入 大鼠单胺氧化酶 (MAO) ,再与 HRP 标记的 单胺氧化酶 (MAO) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 大鼠单胺氧化酶 (MAO) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中 大鼠单胺氧化酶 (MAO) 的含量。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置

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大鼠蛋白激酶A(PKA)酶联免疫分析

大鼠 蛋白激酶A (PKA ) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中 蛋白激酶A (PKA ) 的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 蛋白激酶 A ( PKA ) 水平。用纯化的大鼠 蛋白激酶 A ( PKA ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 蛋白激酶 A ( PKA ), 再与 HRP 标记的 蛋白激酶 A ( PKA ) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 蛋白激酶 A ( PKA ) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠 蛋白激酶 A ( PKA ) 浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置

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大鼠蛋白聚糖4(PRG4)酶联免疫分析(ELISA)

大鼠蛋白聚糖4(PRG4) 酶联免疫分析(ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,组织及相关液体样本中 蛋白聚糖4(PRG) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠蛋白聚糖 4(PRG) 水平。用纯化的大鼠蛋白聚糖 4(PRG) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 蛋白聚糖4(PRG), 再与 HRP 标记的 蛋白聚糖4(PRG) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 蛋白聚糖4(PRG) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠蛋白聚糖 4(PRG) 浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置

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大鼠二氨氧化酶(DAO)酶联免疫分析(ELISA)

大鼠二氨氧化酶( DAO ) 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中 二氨氧化酶(DAO ) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 二氨氧化酶( DAO ) 水平。用纯化的大鼠 二氨氧化酶( DAO ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 二氨氧化酶( DAO ) ,再与 HRP 标记的 二氨氧化酶( DAO ) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 二氨氧化酶( DAO ) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠 二氨氧化酶( DAO ) 浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置

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大鼠二酰基甘油(DAG)酶联免疫分析

大鼠二酰基甘油(DAG) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中二酰基甘油(DAG) 的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠二酰基甘油 (DAG) 水平。用纯化的大鼠二酰基甘油 (DAG) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入二酰基甘油 (DAG) ,再与 HRP 标记的二酰基甘油 (DAG) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的二酰基甘油 (DAG) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠二酰基甘油 (DAG) 浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置

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大鼠钙离子(Ca2+)酶联免疫分析(ELISA)

大鼠 钙离子( Ca2+ ) 酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,细胞上清及相关液体样本中 钙离子(Ca2+ ) 的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 钙离子( Ca2+ ) 水平。用纯化的大鼠 钙离子( Ca2+ ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 钙离子( Ca2+ ) 再与 HRP 标记的 钙离子( Ca2+ ) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠 钙离子( Ca2+ ) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠 钙离子( Ca2+ ) 浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置

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大鼠甘油三酯(TG)酶联免疫分析

大鼠甘油三酯(TG )酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中甘油三酯(TG )的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠甘油三酯( TG )水平。用纯化的大鼠甘油三酯( TG )抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入甘油三酯( TG ),再与 HRP 标记的甘油三酯( TG )抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甘油三酯( TG ) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠甘油三酯( TG )浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置

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大鼠谷胱甘肽还原酶(GR)酶联免疫分析(ELISA)

大鼠 谷胱甘肽还原酶(GR )酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中 谷胱甘肽还原酶(GR ) 的活性。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 大鼠 谷胱甘肽还原酶(GR ) 水平。用纯化的 大鼠 谷胱甘肽还原酶(GR ) 抗体 包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 谷胱甘肽还原酶(GR ) ,再与 HRP 标记的 谷胱甘肽还原酶(GR ) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 谷胱甘肽还原酶(GR ) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中 大鼠 谷胱甘肽还原酶(GR ) 浓度。 试剂盒组成: 试剂盒组成 48 孔配置

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大鼠胱硫醚-r-裂解酶(CSE)酶联免疫分析(ELISA)

大鼠胱硫醚-r- 裂解酶(CSE ) 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆, 组织及相关液体样本中 胱硫醚-r- 裂解酶(CSE ) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胱硫醚 -r- 裂解酶( CSE ) 水平。用纯化的大鼠胱硫醚 -r- 裂解酶( CSE ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胱硫醚 -r- 裂解酶( CSE ), 再与 HRP 标记的胱硫醚 -r- 裂解酶( CSE ) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的胱硫醚 -r- 裂解酶( CSE ) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠胱硫醚 -r- 裂解酶( CSE ) 浓度。 试剂盒组成 :

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大鼠广州管圆线虫IgG抗体(ATCS-IgG)酶联免疫分析

大鼠广州管圆线虫 IgG 抗体( ATCS-IgG ) 酶联免疫分析(ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于检测大鼠血清,血浆及相关液体样本中广州管圆线虫IgG 抗体(ATCS-IgG )水平,感染人的血液学诊断。 实验原理: 本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法( ELISA )测定标本中大鼠广州管圆线虫 IgG 抗体( ATCS-IgG )。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中广州管圆线虫 IgG 抗体( ATCS-IgG ) 相结合 ,经洗涤除去未结合的 抗原和其他成分后 再与 HRP 标记的抗原结合,形成抗原 - 抗体 - 酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),与 CUTOFF 值相比较,从而判定标本中大鼠广州管圆线虫 IgG 抗体( ATCS-IgG ) 的存在与否。 试剂盒组成 :

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大鼠ONOO-)酶联免疫分析

大鼠(ONOO-) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中过氧亚*阴离子(ONOO-) 的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠过氧亚*阴离子 (ONOO-) 水平。用纯化的大鼠过氧亚*阴离子 (ONOO-) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入过氧亚*阴离子 (ONOO-) ,再与 HRP 标记的过氧亚*阴离子 (ONOO-) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧亚*阴离子 (ONOO-) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠过氧亚*阴离子 (ONOO-) 浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48

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大鼠基质金属蛋白酶-3(MMP-3)酶联免疫分析(ELISA)

大鼠基质金属蛋白酶 -3 ( MMP-3 ) 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆, 细胞上清及相关液体样本中 基质金属蛋白酶-3 (MMP-3 ) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 大鼠基质金属蛋白酶 -3 ( MMP-3 ) 水平。用纯化的 大鼠基质金属蛋白酶 -3 ( MMP-3 ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 基质金属蛋白酶 -3 ( MMP-3 ) ,再与 HRP 标记的 MMP-3 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 基质金属蛋白酶 -3 ( MMP-3 ) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中 大鼠基质金属蛋白酶 -3 ( MMP-3 ) 浓度。 试剂盒组成

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大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)酶联免疫分析(ELISA)

大鼠 抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) 酶联免疫分析(ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中 抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中 大鼠 抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) 水平。用纯化的 大鼠 TRAP 抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入 抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) ,再与 HRP 标记的酒石酸酸性磷酸酶抗原结合,形成抗原 - 抗体 - 酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中 大鼠 抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) 浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成

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大鼠硫化氢(H2S)酶联免疫分析(ELISA)

大鼠硫化氢(H2S ) 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中硫化氢(H2S )的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 大鼠硫化氢( H2S ) 水平。用纯化的 大鼠硫化氢( H2S )抗体 包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 硫化氢( H2S ) ,再与 HRP 标记的硫化氢( H2S )抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 硫化氢( H2S ) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中 大鼠硫化氢( H2S ) 含量。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置

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大鼠脑啡肽(ENK)酶联免疫分析(ELISA)

大鼠脑啡肽(ENK) 酶联免疫分析(ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中 脑啡肽(ENK) 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 脑啡肽 (ENK) 水平。用纯化的大鼠 脑啡肽 (ENK) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脑啡肽 (ENK) ,再与 HRP 标记的 脑啡肽 (ENK) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 脑啡肽 (ENK) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠 脑啡肽 (ENK) 浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置 9

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大鼠羟脯氨酸(Hyp)酶联免疫分析(ELISA)

大鼠 羟脯氨酸(Hyp) 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中 羟脯氨酸(Hyp) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 羟脯氨酸 (Hyp) 水平。用纯化的大鼠羟脯氨酸 (Hyp) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 羟脯氨酸 (Hyp) 再与 HRP 标记的羟脯氨酸 (Hyp) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 羟脯氨酸 (Hyp) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠羟脯氨酸 (Hyp) 浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置 9

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