calcium phosphate transfection protocl：1.Split 293FT cells about 30% confluence, overnight.2.Thaw undefinedHBS room temperature (not in 37 C).3.For 10cm dish:1.5ml tube, 4ug packaging plasmid A, 4ug packaging plasmid B, 4ug expression plasmid, 61ul of 2M CaCl2,Mix properly, and then add distil ...
It is quite common to send small samples of plasmid DNA or other relatively stable material to other researchers. The most convenient method of doing this is to include it in a plain envelope mailed to the recipient at the cost of a first-class stamp. We have observed that it is common practice to pipet a few micr ...
走过很多弯路,也做了许多无用功,现在终于有了一点经验,拿出来请大家指教电转化protocol:a.incubation in MRS (10mL)with 1% glucose for 6 hours till OD600=0.4-0.6b.Pretreated with 10ng/mL Ampicillin for 60 minc.Washing with washing buffer two times, and then washing with electroporation buffer one time, resusp ...
做了好事——下载了，要留名啊！http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=2594627fbvwb0br3hfv59kfPrefaceGene therapy and vaccination with nucleic acids is one of the most striking innovations in medical and veterinary sciences. The treatment of a disease on the level of genes rather than on t ...
DNA序列测定技术序列测定的技术和策略Sanger双脱氧链终止法Maxam－Gilbert DNA化学降解法测序策略 目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977）提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭，但这两种方法都是同样生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸，每组寡核苷酸都有固定的起点，但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。由于DNA上的每一个碱 ...
生物芯片发展至今有很多名称和类型，通常将样品的制备，生化反应、结果的检测和分析这三步不同步骤集成为不同用途的生物芯片，据此分为不同的类型。例如用于样品制备的生物芯片，生化反应生物芯片及各种检测用生物芯片等。基因芯片技术发展的最终目标是将从样品制备、杂交反应到信号检测的整个生化检测分析过程集成到芯片上以获得微型全分析系统（micro total analytical system）或称所谓的“芯片实验室”（Lab-on-Ch ...
丁香园医学网站创立近三年，其间积累了大量的文献资料和信息资源，但大部分都分散在各个专业版块，难以给人以整体化、综合化的认识。为了更方便大家总结、利用这些资料信息，我们很早就着手准备《丁香园医学电子期刊》（暂定名）的筹备工作。《丁香园医学电子期刊》（暂定名）从逃、hashimoto等主任的初建，到yangster主任从多个角度的完善，这其中得到了许多热情的战友、主任们的大力支持并提出许多有建设性的建议，特别是版主yan ...
20万元转让DNA抽提系列试剂盒本试剂盒是由复旦大学博士后研制。考虑到目前国内大多数实验室研究经费的实际情况，我们力求研制出性价比比较高的试剂盒。配方、生产工艺、生产材料经过一系列优化，操作方便、生产设备简单、生产材料价廉。生产成本是目前国内最低的。用该系列试剂盒分离、纯化的DNA纯度不亚于国外同类试剂盒，而且DNA的得率较高。经过三年的销售使用，客户反映该系列试剂盒质量可靠、价格低廉，是目前市场上性价比最高的D ...
北京天来生物医学科技有限公司极限低价,全面促销!!!价格一步到位, 何必再谈折扣!无与伦比的低价, 绝不亚于同类产品的质量!效果不理想,无条件退货!一．DNA分子量标准每支(50次)---------仅售 58元!!!二．PCR反应混合液(PCR MasterMix)----500ul 68元三．质粒小提每次1.58元 胶回收每次1.78元四．中范围蛋白质分子量标准(14.3-97.2KD)（50次）------每支78元预染的宽范围蛋白质分子量标准(19-119KD) （5 ...
寄主蛋白指导农杆菌介导植物转化农杆菌在植物转化中已被广泛应用。因为起自然的转移外源DNA到寄主基因组的能力。它同时也是一个重要的植物病原物，这个病原体在几个农杆菌重要的物种中导致crown gall disease ，包括葡萄树、石榴、坚果树。在侵染寄主植物后，细菌从他肿瘤诱导的质粒中转移几种VIR蛋白和T-DNA到寄主细胞。在VIR蛋白的协助下，TDNA转移到寄主细胞的核中并且整合进寄主基因组中，当致癌基因在TDNA ...
From:http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=75&id=5304778&sty=1&tpg=1&age=01.国立生物技术信息中心(NCBI)图谱浏览器(Map Viewer)可以通过NCBI主页进入NCBI的人类图谱浏览器，网址为http://www.ncbi.nlm.nih.gov/。点击右栏标有“Human map viewer”的超级链接即可进入图谱浏览器的主页。页面上端的符号标明此为Build 29，或 ...
1．目的学会CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞。2．原理细菌在0℃ CaCl2低渗溶液中胀成球形，丢失部分膜蛋白，成为容易吸收外源DNA的状态。3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，50ml 微量离心管，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，台式冷冻离心机，制冰机，恒温摇床，分光光度计，超净工作台，恒温培养箱，摇菌试管，三角烧瓶，接种环。4．试剂E. coli XL1-Blue，LB培养基，0.1 mol/L CaCl2溶液，无菌ddH2O5 ...
关于真菌的DNA和RNA提取方法的总结！搞真菌基因功能研究的不可避免的总要涉及到DNA和RNA提取，由于真菌中有较多的多糖成分影响到所提DNA和RNA的质量和后续的分析。因此一个高质量的、实惠的提取方法是我们的优先选择，在此分享一下我一直在用的提取方法，供大家参考。真菌DNA的提取（方法一）1.取真菌菌丝0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2.加入4mL提取液，快速振荡混匀3.加入等体积的4mL的氯仿:异戊醇(24:1)，涡 ...
RNAdraw是一个进行RNA二级结构计算的软件。1.RNAdraw 是windows下的多文档窗口(multiple documentinterface)软件，允许你同时打开多个数据处理窗口。主窗口的工具条提供一些基本功能：打开文件、导入文件、关闭文件、设置程序参数、重排窗口、以及即时帮助和退出程序。主窗口底部状态栏最左边的方框显示鼠标所在的菜单命令的提示信息，而右边三个方框提供了当前激活窗口内容的信息。2.RNAdr ...
收到你的邮件，得知你做转染遇到一些麻烦，看看这个有帮助吗？1。转染方法：有大量的技术和试剂用于将大分子转导至真核细胞中。这些大分子与胞内的组分反应，从而导致基因表达、蛋白质合成、细胞分化的诱导或抑制、细胞形态的改变、细胞的无限增殖或恶性转化。针对不同转染实验的各种目的和要求，没有任何一种方法或试剂对于所有的大分子转导都是最佳的。既然可以象转导蛋白质和小分子一样将DNA，RNA和寡聚核苷酸转导到各种细胞中，本手册将 ...
sds-page电泳主要利用聚丙烯酰胺的分子筛效应分离蛋白质和核酸，SDS-PAG蛋白质电泳分析可从蛋白质亚基分子量的大小就分离蛋白质。几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所有条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集，最常用的就是SDS-PAGE电泳技术，关于大家在此过程中经常遇到的问题进行一些讨论：Q：SDS-PAGE电泳的基本原理?A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙 ...
外源DNA和质粒载体的连接反应外源ＤＮＡ片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链ＤＮＡ５'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成４个新的磷酸二酯链。但如果质粒ＤＮＡ已去磷酸化，则吸能形成２个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有２个单链切口，当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的５'磷酸和３'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的ＤＮＡ连接酶催化，这两种酶 ...
美国康涅狄格州吉尔福德的一幢土褐色办公楼里，一部酷似上世纪90年代老台式电脑的机器正在运转，8英寸的触摸屏上浮动着人体最神秘的“生命密码”。机器下方有4条试管，分别标着一个圆圈、一个X、一个方块和一个加号，代表着鸟嘌呤、胞嘧啶、腺嘌呤和胸腺嘧啶——人类基因的基础构造。这个被命名为“个人基因组机器”（Personal Genome Machine，PGM）的设备，是世界上第一台依靠硅晶体管的DNA解码机，能够在两小时内准确地读 ...
PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10k ...
引言：基因表达谱常被称为是某一生理/病理现象的“分子图像”。这类复杂的“分子图像”，可用于同时检测成千上万个基因的表达水平，再经专门的计算机软件解读出来。研究人员通过比较源于不同病理条件下的“分子图像”的结果，可以识别出引发癌症等复杂疾病的标志物(Marker)。目前，这些标志基因(Marker genes)还有待于大量工作对其作进一步验证。许多科研人员已把注意力投向密度相对较低的功能分类基因芯片(focused DNA mic ...
