lantianshi 请教大家一下，如果我在ncbi上查找启动子时，发现基因有很多的mRNA joins和cd joins，那是不是说明该基因有很多的varient,那会有不同的启动子吗？我还是要取这个转录起始位点上游的序列来作为我的研究序列吗？初学者，敬待解答 ，说明一下我要查的这个基因没有相关文献报道过启动子的相关信息。阿呆硕士 基因的具体具有启动功能的序列并不是一定的，有启动功能的序列或许都有着启动功能，而且启动子的功能 ...

euniceyeh 想请问一下各位大侠？:?)做单核苷酸多态性位点分析时，要做Hardy-Weinberg平衡检验的原因是什么？是证明这个抽样样本来自于一个符合Hardy-Weinberg平衡的群体吗？为什么做SNP分析，一定要确保人群符合Hardy-Weinberg平衡呢？另外，是不是只要对照需做Hardy-Weinberg平衡检验，病例组就不必了？hj841023 同问哦freecell 是为了说明研究所选取的样本具有群 ...

dcr_80 细胞内信号蛋白 ：其功能是从细胞浆到细胞核的转位完成，量没有变化。除了SMAD家族外还有那些呢？好心的战友，帮帮我下。toddy99 STAT, nuclear receptors, NF-kB, beta-catinin,dcr_80 谢谢！！zfyyzz00 smad本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

littlekaka 我手头有一个胞浆蛋白，是一个离子通道的辅助亚基，我的实验设计希望它表达后上膜，现在我的初步设想是在这个蛋白的N端挂一个CD4，但是我担心CD4太大会影响我这个蛋白的本身功能（也许通过改变linker的长度可以减小影响），请问是否有人知道，有没有什么比较经典的改造方式，比如连一个其他什么蛋白甚至某段domain，而对蛋白本身的表达和功能没有影响，不胜感激！zhuqueleee 我记得以前看到一篇文 ...

pmlt 我想做nf-kb的激活，请问如果我只用western 做Ikba和p-Ikba的半定量检测可以么？细胞因子 可以，做完WB后用Image软件经行成像分析，可以半定量检测。园子里有很多这方面的帖子，你可以看看。doctormy pmlt wrote:我想做nf-kb的激活，请问如果我只用western 做Ikba和p-Ikba的半定量检测可以么？细胞因子 wrote:可以，做完WB后用Image软件经行成像分析，可以半定量检测。园子里 ...

海边海鸥 偶的题目大致是研究某一细菌产生ESBLs,其基因组中含有耐药基因，但是表型（药敏试验仍对该类抗生素敏感）阴性。可能存在某些机制使该耐药基因未表达。打算进行该两株的全基因组测序，想请教一下主要从哪几方面考虑未表达的可能性。谢谢大家:)海边海鸥 怎么没有建议呢？zhujoker 我来胡说2句吧，不知道细菌基因组有没有甲基化修饰，自己不做细菌，所以不能确定（但是偶刚才查一下的确好像有这个东西）。你的耐药基因存在不表达是不 ...

pengchen628 各位前辈现有一个问题请教。我是将Tie2/LacZ小鼠的骨髓单个核细胞移植到FVB小鼠身上，现在骨髓移植已经成功。我想鉴定FVB小鼠身上是否有LacZ基因，应该采取什么方法？注：转基因的Tie2/lacZ小鼠可以在内皮细胞专有启动因子Tie2的转录调控下持续表达β-半乳糖苷酶，可与X－gal染色成蓝色，被广泛用于细胞谱系分析。十分感谢！wbald 你都已经说了，X－gal染色呗。pengchen6 ...

kexuely 各位：我在园里里溜达了一下，基本没发现做植物miRNA的。我是做植物的，拟南芥和大豆。我查到的文献中从没见过植物中miRNA的knockout和knockdown，我想请各位讨论一下原因。先说说我的观点,因为对动物几乎很无知，说的可能不靠谱，敬请批评指正：首先说动物里miRNA的knockout和knockdown的方法，基因组水平的可能还是07年那个基因敲除的小鼠，用的是基因重组的原理，其他的像L ...

oliver1981 请问P53与磷酸化P53有何区别？ 多谢！freecell 野生到P53蛋白在维持细胞正常生长、抑制恶性增殖中起着重要作用，因而被冠以"基因卫士"称号。P53基因时刻监控着基因的完整性，一旦细胞 DNA遭到损害，P53蛋白与基因的 DNA相应部位结合，起特殊转录因子作用，活化 P21基因转录，使细胞停滞于G1期；抑制解链酶活性；并与复制因子A（replication factor A）相互作用参与DNA的复制与修复；如果修 ...

antonio2001 细胞里的beta catenin 好检测吗？？ 用 western blot 和免疫细胞化学 ？？2008851029 细胞里的beta-actin非常好检测（我用的是ST的抗体）littlebee83325 什么细胞呢？胞浆蛋白么？magichunter beta catenin 好检测，细胞全蛋白裂解液上样20uL（15ug左右），8% SDS-PAGE就能够分出来，另外在检测beta catenin 的同时一般还要检测磷酸化的beta catenin ...

hj841023 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/224514928?report=genbank&log$=seqview&from=11637691&to=11820525刚开始着手实验前期工作，有很多不懂的，请教论坛里各位高手，如何看懂GenBank里的ATM基因DNA序列,以上是相关链接。谢谢各位指教了。:)freecell 请参考这个帖子：http://www.dxy.cn/bbs/pos ...

qinna767 系膜细胞中活性氧对一氧化氮的影响有种这方面的同志不？目前的文献有氧化应激下NO升高，也有活性氧升高，NO生物利用度降低，eNOS解耦联产生活性氧，NO降低的为什么会有矛盾的报道有人做这方面的研究不？大家交流一下新手上路，欢迎指教苏叶 我们目前做的类似实验验证了你的后一个观点，氧化应激引起eNOS脱偶联，NO生物利用度降低，同时也观察到NO产量降低，因为超氧阴离子消耗了NO，阻碍了其生理功能。不过在炎 ...

水可 RT，是用全透明的，还是黑色不透明的，还是白色布透明的。谢谢啦，michaelmichael 普通的96孔板就可以了。sosorunning michaelmichael wrote:普通的96孔板就可以了。:X透明的会有干扰的，黑色的会降低灵敏度，所以一般大家都用全白不透的板子。ffyy8888 晕，如是读板器直接读板的话，要选择底透明，壁不透明的96孔板:Dffyy8888 因为只有这样才能不干扰检测，且机器可直读荧光:o)mo ...

molrep 有哪位战友知道怎么做全基因组的基因knock-down,我听说有全基因组的shRNA文库,怎么用这个东西呢,谢谢bigbang_0_0 做转染，然后看你们所期待的表型有什么变化即可freecell 何不参考一下这篇文献？http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B8G3Y-4TT80P4-1&_user=10&_rdoc=1&_fmt=&_orig=sear ...

magic10号 今天刚买了merck公司的Tubulin Polymerization Inhibitor II但是里边没有使用说明书在网上也没有查到希望哪位高手可以给我相关信息也可以提供用过这种试剂的文献感激不尽！！freecell 你要什么样的说明书？它的产品说明里有篇参考文献，可参考之。magic10号 谢谢你啊不过我想要的是使用说明书就是用量之类的昨天查了文献也没找到具体的说明版主freecell留言:它的产品说明后 ...

mayingsheng 我想给慢病毒转染的RNAi带上抗药性筛选靶位和生物素酶的基因，有公司说不能同时带上两个标签，我的问题是：1、能否同时带上两个标记？2、那家公司可以做到：既设计RNAi及构建慢病毒载体，并带上以上两个标记？谢谢版主freecell留言:"那家“和”哪家“是不同的指代名词。ztxia 这里面主要有一个基因大小的问题，慢病毒载体一般要少于4KB，最好在2KB以下。同时带这两个标签可能超出的这个范围.版主f ...

163abcdc 请教大家问题，我在读文献时发现肿瘤细胞有p53 wild type,p53 null和p53 mutation 之分？请问有什么区别？谢谢！jiachengyou2007 p53 wild type: 可检测到基因表达，也具有功能；p53　null:相当于纯合性缺失，既检测不到基因表达，也无功能；p53 mutation 可检测到p53表达，但无功能。一已之见　欢迎拍砖版主freecell留言:非常感谢你精彩的答复，欢迎有空多来生化版做客。wylio ...

gingerdaming 做miRNA的报告基因，用的是miRNA mimics 和miRNA inhibitor转染.结果与对照相比，荧光强度miRNA mimics 对照〉miRNA inhibitor。本人第一次做双报告，望指教！jiachengyou2007 　　结果与想要的正好相反。　　请问你的荧光强度相差多少？建议下次再提问时把问题说得清楚一点。别人更容易直接回答。　　gingerdaming 不好意思，mimics的荧光强度约是对照的1.5倍，对照 ...

163abcdc 请教大家问题，我在读文献时发现肿瘤细胞有p53 wild type,p53 null和p53 mutation 之分？请问有什么区别？谢谢！doctormy P53基因分野生型和突变型，野生型P53基因即抑癌基因，对细胞增殖有控制作用和负调节作用；突变型P53基因丧失抑癌作用，促进细胞向恶性转化。p53 wild type-----表明该细胞的p53基因为野生型p53 null----------表明该细胞p53基因表达缺失p53 mutation ...

zhilan1985 我用抗肿瘤药物处理后细胞发生了凋亡，但是RT-PCR结果显示原癌基因c-myc表达上调，文献上在其它细胞实验中显示有下调的，有不改变的。感觉结果有些奇怪，请问在抗肿瘤细胞生长的情况下，有可能会使c-myc表达上调吗？还望了解c-myc的高手帮忙解答下，谢谢!doctormy zhilan1985 wrote:我用抗肿瘤药物处理后细胞发生了凋亡，但是RT-PCR结果显示原癌基因c-myc表达上调，文献上在其 ...