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【求助】食管癌细胞EC109和Eca109是同一株细胞吗

xjtudj 食管癌细胞EC109和Eca109是同一株细胞吗?在细胞库里看到他两有不同的资源号,搞得我迷糊了。胡图伊什 应该不是同一株最近也正在四处找食管癌细胞株的信息wangwei006114 楼主在哪做食管癌研究啊xjtudj wangwei006114 wrote:楼主在哪做食管癌研究啊学校,我还是学生。美美88 请问,现在搞清楚了吗?我也想知道有什么区别!请告知,多谢了!我的邮箱chenjm76@163.compengy0 ...

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【求助】Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒的使用

mmsong1987 我买了Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒,想研究某种材料的细胞毒性,看其是否会诱导细胞凋亡。之前做过MTT之类的检测,结果显示材料基本无毒性。由于条件限制(流式细胞仪在我们学校另一个校区)不能及时进行检测,前两天进行了一次实验,是将细胞收集后拿到测试地点再进行的荧光染色处理,检测结果显示阴性对照组没有加材料处理的细胞也多处于凋亡状态,个人猜测可能跟细胞在路上耽误的时间有关(悬浮在An ...

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【求助】蛋白激酶C的信号通路

578475733 因最近要做蛋白激酶C在糖尿病方面的实验,求助各位高手有没有蛋白激酶C信号通路的图片,最好带注解,十分感谢。石依信念 我也想要~~~~黑胡桃 data:image/png;base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAskAAAGdCAYAAADgwu6RAAAgAElEQVR4Aey9B7xdxZXmu04+NypnIRQIAkkkAxIZJBDJ4ADO7qbHoZ3etO32G3 ...

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【求助】我用几种通道抑制剂做实验,不懂该怎么做,求助大神的帮忙

陆小疯 各位大神。本人最近开始做实验。Src inhibitor (PP2),PLCγ1 inhibitor(U73122),ERK1/2 inhibitor (PD98059)这几个细胞通道的抑制剂。能抑制细胞migation.文献上说是用上述某浓度的处理30min。再继续实验。但是人家文献上的细胞只培养了8到12h。而我要培养4周。想请问各位。我是要在培养液中配置上述的浓度抑制剂使用。还是就是细胞预处理。然后按照以往一样培养。但是如果 ...

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【求助】关于k562细胞培养

mhy叶可 大家好,我是新手,第一次养细胞,恳请各位大虾给点关于培养K562以及K562/A02的建议。K562是悬浮细胞吗?还是半贴壁?半贴壁的话应该怎么换液?请各位老师不吝赐教,多谢,多谢。yupingwang 悬浮细胞,离心后去上清,培养基重悬mhy叶可 多谢,以后还要多多请教,呵呵mhy叶可 请教楼上老师,k562/A02耐药细胞株培养时,怎么维持它的耐药性,加阿霉素大约从什么剂量开始加?百迈生物 mhy叶可 wrote:请教楼上老师 ...

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【求助】关于LPS刺激raw264.7 检测il-6的问题

holiday2008 各位高手,我用LPS刺激raw264.7细胞,24h后检测TNF-a和IL-6,发现TNF-a大量释放,但IL-6却没有检测出来(试剂盒没问题)。这是怎么回事啊?主要是我去年做的时候IL-6都很高。请各位帮帮忙,谢谢了!与你无关 LZ 我也想知道啊 是不是细胞状态不对啊我的细胞是冻存了一年之后再复苏的,做不出以前的结果了。。。caesar1112 holiday2008 wrote:各位高手,我用LPS刺激raw264. ...

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【求助】请教!我用无血清培养基养的胃癌原代细胞,为什么会出现这种小颗粒?

暮色英雄 我是用无血清NB培养基+EGF+bFGF+B27+p/s双抗的培养基培养的胃癌原代细胞,培养基已经用0.22μm过滤器过滤除菌,但是培养细胞之后出现很多小颗粒,不知道是什么东西,这照片是昨天照的,今天再观察的时候这些小颗粒已经长满了,我师姐帮我看了说是污染,然后我把细胞倒掉了,但是她也不知道这是什么污染。希望各位大侠能帮小弟看看这到底是不是污染,是什么东西?谢谢了这是20x镜拍的ecust小熊 真菌污染吧?双抗无 ...

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【求助】高脂小鼠p-AKT水平

chenyingweixiao 急向各位战友求教:我用高脂饲料喂养C57小鼠10周后,WB检测小鼠脂肪组织p-AKT水平,结果显示与普通饮食小鼠相比是升高的,但是文献上报导的是降低的啊,这是怎么回事呢ourlab 在样品获得的过程中pakt迅速被去磷酸化。随着时间延迟,pakt水平越低。你如果在处理两种小鼠以获取样品所用的时间不同,pakt水平就不能反映真实状况。所以应以尽量短的时间和尽量相同的时间获取样品。参考以下 ...

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【求助】请教雷帕霉素诱导细胞自噬的机制

巴巴布拉拉 本人系科研新手,丁香园新人.最近关注雷帕霉素诱导细胞自噬,很多材料上都写雷帕霉素诱导自噬是作用于mTOR引起.mTOR分为mTORC1和mTORC2.又有材料写mTORC1对雷帕霉素敏感,但与自噬关系不大,mTORC2对雷帕霉素不敏感.那雷帕霉素诱导自噬到底是作用于mTORC1呢还是mTORC2呢?想不明白这个问题,敬请诸位前辈能赐教。初次法帖,如有不妥,请版主指教。无言言无 Rapamycin-Induc ...

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【求助】关于阴道鳞状细胞原代培养

bahai 各位老师好,最近在做阴道壁鳞状细胞的原代培养,一直不见起色,培养不成功,情况就是没有任何细胞长出来,特来请教大家。看了好多文献,看了很多细胞培养的资料,咨询过很多同学,然后做了多次,都是没有细胞,呵呵现在有这么几个问题:1:培养基的选择:文献中都说用的是K-SFM培养基,我现在是用了K-SFM培养基和DMEM/F12两种培养基同时做,希望对比一下两种培养基的情况。结果都是没长出来,DMEM/F12时,24小时候, ...

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【求助】干细胞培养:换液后之前贴壁的细胞不见了!(仍可见部分贴壁细胞)

tangc233 一直在养骨髓间充质干细胞,年前出现了一次细胞污染,年后我改用进口血清,同时每次配完液(低糖DMEM+10%血清+双抗)后都用滤器过滤一下,最近发现细胞不肯长,甚至之前都贴壁生长的细胞换完液后2天大半都不见了,但还可见一些贴壁细胞(换液前后的培养液配置都是一样的),现在我也不知道问题出在哪里,还请各位高手多多指教!宋丽娟1016 我想,你可以从以下几个方面考虑:1,是不是你的双抗浓度太高了呀2你的细胞是第几 ...

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【求助】关于4度离心的问题。求助高手

honbin 由于实验条件有限,现在用某厂商试剂盒提全血中的rna,在裂解细胞的时候需要在4度离心机中2100rpm离心10分钟。请问,4度离心的目的是什么?如果不在4度中离心,结果会出现怎样的偏差?请高手帮忙解答,谢谢。selleckchem01 低温离心主要是为了降低RNAse的活性,防止RNA被降解honbin selleckchem01 wrote:低温离心主要是为了降低RNAse的活性,防止RNA被降解好的。非常感谢 ...

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【求助】miRNA mimic用FAM标记后,转染细胞,荧光显微镜下观察

batton 转入细胞的可见FAM标记的绿荧光,不过本人有一点搞不懂,可能有一些是没有转进细胞的,为什么细胞外就看不到荧光呢?吴佰霖 能不能这样理解,进入细胞后就具有了聚集的作用,分散在培养基中就不明显了ouyi2738 你好,我想问一下你每次转染后多长时间观察,还有用的miRNA mimic的量是多少啊,我稀释到20mM,每次转2ul,也就是200pM,可是在倒置荧光显微镜下观察到的荧光很弱@batton。谢谢!lvhen5 ...

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【求助】结肠癌细胞株的区别

泥小明 小弟刚开始入手生物实验,弱弱地问一下各个结肠癌细胞株有什么区别啊?实验时候该怎么确定用哪个细胞株?HT-29,SW480,SW620,Caco-2,T84,LoVo,LS174泥小明 怎么没有人?发错版块了吗?roy2929 选哪种也要根据实验的吧比如 检测下要研究的蛋白在哪种细胞系里水平最异常 或者某个表型最明显然后对这种细胞系展开进一步研究,应该会容易出结果。当然也要考虑细胞本身好不好养,转染方不方便,等等我也是新手,懂得 ...

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【求助】细胞学方法做抗炎实验

夏天的雨滴 能不能用细胞学的方法去研究药物的抗炎机制呀,用哪种细胞作为模型细胞呢???急呀,请求高手相助xindiwuzhe 可以,能很快出结果的是原代的巨噬细胞,可以制备小鼠巨噬细胞,具体方法园子里很多,然后用LPS刺激,检测各种炎症指标就可以了。夏天的雨滴 谢谢啦,查到相关文献啦小哇and命运古道 你也是提之前打肉汤吗??不打肉汤直接用LPS体外刺激巨噬细胞可以吗夏天的雨滴 我还没有着手做,现在是写实验方案阶段,不好意思小哇an ...

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【求助】检测细胞周期实验中,s期增多,说明该种处理是抑制细胞增殖还是促进细胞增殖?谢谢

zasnaagua 检测细胞周期实验中,s期增多,说明该种处理是抑制细胞增殖还是促进细胞增殖?谢谢bigbang_0_0 当然是抑制,因为S期的主要任务是DNA复制,DNA复制本身就是细胞增殖的必要条件。但是仅仅通过细胞周期分布分析不足以证明细胞的增殖速率的改变,MTT或者cologenic assay才能提供直接的证据吴佰霖 个人认为是另外一种阻滞,建议做MTT验证zasnaagua 那请问做了MTT以后,发现该种处理确实使 ...

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【求助】怎样寻找调控A蛋白的上游调控基因

菊开那夜 向各位高手求助,A蛋白,被RNAi后,可以延长秀丽线虫寿命,它的这个作用部分依赖于DAF-16转录因子的调控,但研究证明,其对线虫寿命的影响还有部分不依赖DAF-16的调控,我希望能够寻找可能参与的其他信号通路,该如何设计实验?qing0831 可以同时制备一个针对A蛋白的RNAi干扰模型和过表达模型,然后用表达芯片分析哪些基因发生了明显的下调和上调,再根据这些基因寻找相关的信号通路。我曾做过类似的实验,如有 ...

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【求助】磷酸化和没有磷酸化的蛋白引物有没有差别?

医者为公 急急急求助:磷酸化和没有磷酸化的蛋白引物有没有差别?最近在做RT-PCR的前期准备,对引物不是很了解,想找磷酸化蛋白引物,但是在外文里面都只有非磷酸化的蛋白引物,想知道,他们之间是否有差别。谢谢!xxtlxx 磷酸化是蛋白水平的修饰,RT-PCR测的是RNA水平,是转录水平,概念都不是一个。bigbang_0_0 。。。。。。wenzonglu 蛋白怎么跟引物混到一块去啦?本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资 ...

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【求助】同是肝癌细胞分别做体内和体外有同等相看吗

holybible1263 请问体外做hepG-2,体内做H22,有可比性吗?fuxiao29 我个人认为体外做hepG-2实验,体内也应该用同一种细胞系做,这样才有可比性。holybible1263 谢谢,不过HEPG-2没有办法做体内呀,体内要用什么呢?fuxiao29 可以做体内实验呀,你可以将你用的质粒转染到HEPG-2细胞系里,构建稳定细胞系,然后注入动物体内。xiayuxue 据说HepG2很难成瘤本文由丁香园论坛提供,想 ...

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【求助】LS 174T 细胞培养问题

chuenshui 细胞株:LS 174T来源:中科院上海细胞库培养基 :DMEM 10%小牛血清问题:刚买回来时传代2次,都没问题。扩大培养时发现,细胞养起来时培养基发紫,0.25%胰酶消化传代,24小时候细胞50%不贴壁,细胞还呈发亮状态。尝试解决办法:更换培养基,10小时后培养基发紫,细胞依然呈漂浮状态。无解决现象。请问有什么办法可以解决,培养箱应该没问题,箱子里有同时培养的其他细胞,无异常现象。布布vs果果 细胞有抱团生长现象吗?s ...

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