实验简介细胞因子在淋巴细胞免疫功能调节方面发挥重要作用，它可以调节多种细胞的生长、分化和功能，调节正常与病理状态下的免疫应答。研究生理或病理免疫调节因素导致细胞因子合成的应答与改变是探寻疾病病因与免疫状态关系的重要工具。本实验采用优化的一管 8 色的多色检测方案对人外周血 T 细胞亚群的 IFN-γ、IL-17、 颗粒酶、穿孔素表达情况进行了研究。从实验结果图上可看出，本实验在 CytoFLEX 上检测时各细胞群体分群明显，检测结果确切可信， ...
实验简介囊泡天然存在于体液中，并稳定携带了一些重要的信号分子。囊泡相关功能的研究已经成为研究热点，并有望在多种疾病的早期诊断中发挥作用。通常因流式细胞仪无法检测低于 250nm 的颗粒，因而并不是检测囊泡微颗粒的最佳选择。而贝克曼库尔特公司 CytoFLEX 流式细胞仪的问世，为流式检测囊泡微颗粒开辟了蹊径。 CytoFLEX 是第一台可检测 100 nm 微颗粒的流式细胞仪，并具有可同时检测 13 色荧光、单个样本存储量大等 优秀性能，为微颗粒的检测提 ...
实验简介13 色淋巴亚群免疫功能检测，利用高度集成，卓越检测性能的 CytoFLEX 对外周血中高度异质的 T 淋巴细 胞亚群进行分析，10 色 Duraclone IM T 细胞试剂盒 (CD45RA-FITC, CD197-PE, CD28-ECD, CD279-PC5.5, CD27-PC7, CD4-APC, CD8-Alexa-Fluor 700, CD3-APC-AF750, CD57-Pacific Blue, CD45-Krome Orange) 为 贝克曼最新用于淋巴亚群检测的干粉试剂，加上 3 个液体试剂 (CD95- ...
宽度:640 px高度:338 px维持原图长宽比:确认Origin 是 OriginLab 公司研发的专业科研软件，具有完善的数据分析处理能力和专业制图能力。想要分析实验结果、做汇报、发 paper，都少不了 Origin 的处理。不同学科的数据处理方法可能不同，但一些基本的数据表示方法是共通的，如散点图、柱状图、直方图和饼状图等。今天，我以柱状图为例子，教大家如何用 Origin 将朴素的数据结果图，变得更加赏心悦目。数据生成我使用的软件版本是 Orig ...
前段时间，网上疯传一个关于李克强总理对博士「工资」看法的视频，在广大的学术圈子引起了非常大的反响。我们期盼已久的「好日子」终于要来了。几个月已经过去了，博士的「工资」涨了吗？我们博士的生活是否因为这个事件发生改变了呢？李克强总理原话：「你有钱，你不给学生，你拿它干什么用。」「我觉得还是要两条腿，第一呢，就是基础的助学金应该提高，1 000 块钱确实太低了，而且是若干年前的，但是，第二呢，还是要鼓励竞争机制……」星星之火1 月 9 号，北京生命科学 ...
引言本人县级医院在职硕士一枚，科研基础菜鸟级，有幸被单位选中到德国攻读博士学位，英语基础 50％。半年后「实际用时 4 个月」在线发表一篇影响因子 5.3 的综述，以下是本人的写作过程和心得体会，供君参考。读博之前，英语基础真不咋的，都看不懂导师的论文，只知专业是免疫。见到导师后，才知道他分配我做移动医疗与过敏性疾病的工作。因鄙视我的英语基础，先来个综述练练手，学习基本功。综述主要关键词为 mobile phone，allergy，开始查 pubme ...
宽度:620 px高度:474 px维持原图长宽比:确认最怕......办公室突然安静最怕......导师突然的关心最怕......组会突然来袭绞痛着不平息最怕......突然听到导师消息胖友儿你有多久,没有接到让人心跳加快的电话了你有多久,没有紧张颤抖着点开一条短信了你有多久,没有对着微信对话框删删改改欲言又止了......o(°▽、°o)一个美妙工作日的下午......嗯......? ( ・◇・)天呐呐 ~~~~~ Σ( ° △ °|||)瞬间整个人好像被掏空......「被传唤前 濒临呆滞的我」一个美 ...
今天准备跟大家分享一下 qPCR 引物设计的具体流程。在进行引物设计之前，首先大家都应该了解引物设计需要注意的一些细节与原则，归纳如下：引物设计原则1. 引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。要设计引物首先要找到 DNA 序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构，就要避开它。如这一段不能形成二级结构，那就可以在这一区域设计引物。2. 产物不能形成二级结构。3. 引物长度一般在 15～30 碱基之间 ...
这是一篇临床 Meta 分析连续性变量资料的操作流程，由于临床研究生时间紧迫，在有限的时间里阅读了大量的文献，却没有时间写一份质量上乘又会得到关注的综述性文章。本操作流程旨在一步一步教会临床的研究生在最短的时间内了解 Meta 分析软件的运行，并且快速的根据课题需要写一份 SCI 综述。本文主要根据「Meta 分析软件应用与实例解析」，主编郑明华的操作流程说明和个人的实际操作情况。Meta 分析——Rveman 5.3 软件在连续性变量上的实例应用。 ...
EndNote 作为一科研利器，是众多科学研究工作者必须掌握的基本技能之一。下面我们将详细介绍 EndNote 的基本使用方法和如何才能编辑出适合投稿杂志要求的参考文献格式。EndNote 安装下载安装程序包后点击安装运行，由于需要安装插件到 Word 文栏中，所以切记在安装前关闭 Word 文档。安装完成后新建一个图书馆，选择相应的储存位置，并将产生 1 个链接图表和 1 个储存文件夹，所有导入 EndNote 的文件均以一定编号的形式存放于文件夹 My EndNo ...
实验室里冷极了，厚厚的窗帘挡在那里，不知道是白天还是黑夜。这是一个假期。在这又冷又小的屋子里，主人公小南--一个蓬头垢面的小女孩还在座位上坐着。她穿着一件又脏又旧的白大衣，上面全是伊文式蓝和苏木精的污渍。这衣服她只在工作的时候才穿。实验室的同学嘲笑说，可以拿它当抹布。小女孩只好一个人做实验，小脸冻得青一块红一块。她的旧电脑里有好多数据，实验记录本里还有一大堆。她这一整天，算了好几遍，可还是没有想要的趋势。可怜的小女孩 ...
每一个做过分子克隆的人，都会经历过对条带、对转化子望眼欲穿的时刻，除了攒人品，每一步的细节也很重要。1. PCR 引物设计通俗地说，很多人用了很多软件设计来设计去，又是考虑发夹结构，又是考虑二聚体，又是考虑 Tm 值，折腾来折腾去，但其实没那么复杂。首先保证你要的基因是正确的，这个可以从 NCBI 中找到，大部分是没问题的，然后再找到起始密码子，从那开始大概上游取 20～27 bp，加上酶切位点，加上保护碱基（一般 3 个）就是上游引物，取后 20～27 bp 碱基，反向 ...
自 1992 年绿色荧光蛋白被用于标记基因，各种颜色的荧光蛋白被开发出，目前有上百种的荧光蛋白。在我们的实验中，经常会用到荧光蛋白，但是如何选择合适荧光蛋白，得到完美的实验结果？相信这个问题一直困扰着大家，鉴于此，小编从不同的角度去考虑如何选择荧光蛋白，希望可以给大家在选择荧光蛋白方面提供一些帮助。Tubes of various fluorescent proteins displayed in a box with UV light shining on them。单 ...
你可能也参加过这样一场聚餐一群半熟不拉熟的、半认识不认识的师兄姐弟妹们因为参加会议、培训、讲座等原因被安排着欢聚一堂(大致入座如上)呃(⊙o⊙)......气氛有一丝小小的尴尬......就在这时A 师兄机智地起了一个话题!!!但很快气氛又不出所料的冷下来了嗯...没关系!受到启发的 B 师兄很快又抛出了一个新话题但很快气氛又冷下来了...这...可能是一场大型尬餐...沉默沉默沉默...沉默...... 是今晚的康桥......(￣┰￣~B...这时黑暗中有一个声音在说 ...
作为一个科研人员，我们可能会遇到下面这些问题：刚进实验室，纠结到底先干啥？是看文献？是上课？是帮师兄师姐打杂？要开题了，从哪里开始呢？是自己捣鼓？是问师兄师姐？还是看文献？背景了解得一般般，就急急忙忙开始实验，结果发现课程设计有问题，咋整？是继续做实验，还是停下来看文献？英语基础一般，SCI 论文写不出来，难道要从头开始学英语吗？我想我们中的很多人都遇到过上述的某一个或某几个问题。这些问题的解决都绕不开文献。那么如何理解文 ...
很多人读研读博并不是为了以后从事科研工作，而是减轻暂时工作的压力或是社会上就业门槛提高。那么有人会问，这样是不是浪费了呢？你做科研学到的东西在非科研工作上有用吗？其实大可不必担心。你科研期间学到的一切对你日后从事任何工作都是有帮助的。不信我们来看看 Science 上最新的文章，里面有几位 PhD，他们毕业以后没有从事科研相关的工作，看看他们是如何把科研技能转化成新的工作技能。1. 学习新的领域主人公介绍：Kenneth Gib ...
ELISPOT（Enzyme－linked Immunospot Assay）全名为酶联免疫斑点检测，结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术，能够检测到单个细胞分泌的细胞因子情况。简单来说，就是用包被好的抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其呈现出来。ELISPOT 实验原理ELISPOT 实验使用 PVDF 膜为底的 96 孔板（cat：MSIPS 4510，Millipore），包被上特异性的单克隆抗体（需要无毒，不含内毒 ...
近年来，基因编辑技术已经得到了迅速的发展。CRISPR- Cas9 作为第 3 代人工核酸内切酶系统，是一种具有广阔应用前景的基因定点修饰工具。利用的 CRISPR- Cas9 系统建立基因敲除的细胞系，具有时间短、难度低、费用少等优点，是广大科研工作者的好帮手。1、基因打靶细胞系制备的基本原理基因打靶是指通过 DNA 定点操作，改变基因组中的特定基因的编码序列，从而在细胞或生物活体内研究基因的功能及干预。细胞系基因打靶最常见的是基因敲除，其原理是 ...
「柚子酱的结缘屋」科研男孩系列
细胞培养的过程大概是这样的: 失败—成功—体味—收获—思考—交流, 你到了哪个阶段? 不妨和我们一起来看看丁香园上各位站友养细胞的那些事.1 心肌细胞培养体会作者:windboy77记得刚养心肌细胞时候, 开始时候很顺利, 但有一次突然细胞就不怎么贴壁了, 换液时候一吹打, 就发现有许多细胞脱落. 我检查了培养箱, 可是别人的细胞都长的很好, 培养基的问题? 我仔细观察了一下, 培养基粉红透亮, 绝对不会污染, 血清也没有问题, 大家都是公用的血清.当时我很迷惑, 后来我向老师如实反映问 ...
