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图说基因点突变 | 实验时间

基因的体外定点突变是常用的分子实验技术,主要用于研究蛋白质结构与功能关系或者验证 microRNA 与靶基因是否结合。今天为大家介绍下基因突变质粒的构建原理与方法。第一阶段:野生型质粒构建1. 引物设计:根据需要验证的基因序列,设计需要扩增的基因片段引物。引物设计方法如下:(1)引物 F:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 1 酶切位点序列 + 基因正向引物序列 - 3’端(2)引物 R:5’ 端 - 保护碱基序列 + 限制性内切酶 2 酶切位点序列 + 基因反向引物序列 - 3’端通过加入基因组 DNA 模板以及设计 ...

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学霸唠唠│有人边工作边考研嘛?能安心嘛?

本人毕业工作以来总在学历这方面碰壁,想着自己年龄比同届得人都大就没有考研,早早出来工作是一样得,后来有人跟我说毕业了之后也是可以考研得,只要自己坚持,好多人还一边工作一边考研呢,真的嘛?大家有多少是这样得呀,心态又是什么样得呢?好考嘛?烦恼多嘛?还是说要辞掉工作,专心考研。那样会不会考不上后工作还要重新找(来自丁香园站友@金风相送 1122)图片来源:soogif.com@皓轩学长:你现在纠结的问题,和我当年遇到的问题,一 ...

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如何用 David database 批量搜索基因文献?

使用 David database 进行 GO、KEGG 等富集分析你或许比较了解。但它还可以用以大批量搜集基因功能通路相关的文献哦。尤其是当你面对一堆基因需要查阅文献时就知道有多么感激 David database 了。下面以 28 个 gene symbol 的基因列表演示一下过程:打开主页(想直接复制网址的童鞋们,可在生物学霸后台回复基因网址即可),点击 Start Analysis。依次在 Upload 界面按步骤上传列表,Background 界面选择物种,List 界面选 ...

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其实,每年应该有更多的冠心病患者可以活下来

2018 年元旦期间,我们推送了一篇劝大家戒酒的文章。这篇文章在酒圈引起轩然大波,阅读量很快就突破 50 万。来自剑桥的研究团队发现,由于人体酒精代谢相关基因的存在基因型多样性,那些乙醛脱氢酶基因有缺陷的人,酒精代谢产生的乙醛不能降解,会提高多种癌症风险。这就是同样是喝酒,不同的人却有不同反应的原因。其实用药也存在这个问题。中国人基因多态性可致支架内血栓风险增加近 5 倍去年年底发布的《中国心血管病报告 2017》 显示,我国心脑血管疾病 ...

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学霸唠唠 I 哪句话/哪个人曾在考研复习时给你力量?

不知各位在漫漫长夜考研复习时,哪句话/哪个人曾给你力量,可以分享给大家共勉。图片来源:soogif.com@ 玉流苏:一直用的自己做的图片做电脑桌面,下面菜单栏那里显示一行字——我若不勇敢,谁替我坚强,有了难事就多想想这句话,「我若不勇敢,谁替我坚强」。开了战就先不要想二战,全力以赴做到极致再说,实在恐慌,存点钱吧,二战基金,我早已成年,父母早就没有义务承担我的花费,二战,再来一年,日渐衰老的父母凭什么要再来为我的蹉跎负担一年。。 ...

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学霸唠唠│科学家的优秀是否由发表文章多少决定?

有感于当今学术界的治学态度,我觉得有部分科研工作者的科研态度是成问题的。虽然这些人不一定急功近利,不一定高调自大,但是 CNS 如同符咒一般,给他们套上了精神枷锁,更迷惑了一些年轻科学家的心。是的,好文章多多益善,决定了我们在学术界的生存状态,自然也直接与个人收入与生活状态挂钩。但是,文章的多少、文章影响因子的高低就决定了一个科研工作者的成败与否么?请过来人指导一下我们这些年轻的科研者。@星晓:文章能不能发在 CNS,好的 IDE ...

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医生护士究竟有多辛苦?│唠唠

前一段时间遇见初中同学,聊起来工作的时候,知道我是医生,她就顺口来了一句:「那你们每天是不是挺辛苦的啊?」我当时不知道怎么回她,我是要谦虚的说,大家都辛苦呢…… 还是就是老实的告诉她,我们就是很辛苦……后来我觉得,这个话题,还是身为医生护士才最有发言权。所以,大家来说说吧,医生护士到底有多辛苦?(比惨的时候到了…… 哈哈哈)(来自丁香园站友@熊欣欣)@无忌一指灵素:我大年初五主班,犯心绞痛,含服硝酸甘油片。坚持用 word 打印一份病史简要,一 ...

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如果生命只剩下 24h,你会选择怎样度过?| 唠唠

作为医护人员,大家看多了别人的生死,来说说如果是自己的话,会有什么样的选择吧!△ 图片来源:网页截图只是假设哈!@yuzx_zdm: 如果生命真的只剩了 24 小时,想起了俺那未通关的游戏,了!!!......@瑞雪初晴: 我会想方设法不死在亲人面前,我会一个人静悄悄地投身大海,让爱我的亲人脑海里永远存留着我鲜活的面容。@语笑嫣然: 去陪爸爸妈妈,然后在最后的时刻回到 LG 身边,握着他的手死去。@紫妍: 好好地哭一场, 然后买好多的零食,然后出走...@greenb: 如果现在 ...

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实验专题更新公告

可能很多小伙伴们会遇到类似的问题,在查某个实验时,如 PCR 实验,发现该实验相关的内容很零散,想集中看完整个实验流程中的各个细节,却总是东找找西找找,很心累。于是,学霸君特意推出实验专题精选内容,每周会不断更新,将每个实验专题进行系统化梳理,可节省大家宝贵的时间,让大家专注于做实验研究。查看方式第一步:打开生物学霸,点击科研宝典,会出现实验专题。第二步:点击实验专题,出现如下各个专题内容。第三步:可点击各个专题。如对 PCR 感兴趣 ...

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科研人员必看:经费使用自主权更大、薪酬激励更多......这些重磅好消息别错过

国务院总理李克强 7 月 4 日主持召开国务院常务会议,确定进一步扩大科研人员自主权的措施,更大释放创新活力。会议指出,要落实习近平总书记在两院院士大会上的重要讲话精神,按照党中央、国务院部署,深化科技领域「放管服」改革,按照能放尽放的要求赋予科研人员更大的人财物自主支配权,充分调动他们的积极性,激发创新活力,壮大经济发展新动能。一是改革科研管理方式。凡国家科技管理信息系统已有的项目申报材料,不得要求重复提供。减少各类检查、评估、 ...

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手把手教你用 Quantity One 计算电泳条带的分子量

做分子生物学和生物化学实验的同胞们,每天不跑个几块蛋白胶都不好意思说自己做了实验。蛋白胶跑完后,有时我们只需要用肉眼对结果进行分析,而有些时候,则需要借助软件。最常用的电泳条带分析软件非 Quantity One 莫属了。笔者曾请教过实验室的各大师兄师姐,结果无一例外大家都是靠 「肉眼分析」,没办法,笔者只好自己摸索着学习。现在,笔者手把手教你如何用 Quantity One 计算电泳条带的分子量,师兄师姐们也来看一看噢。打开 Quantity ...

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唠唠│如果不考虑待遇与面子问题你打算做什么工作?

昨天看了丁香园一个文章,说自己当初怎么选的学医,理由很多,有数学不好的,有父母劝的。想问问各位同行,如果不考虑这些问题,仅仅是从你最初,或者小时候的想法出发,你会想做什么?开个蛋糕店?还是卖水果?(来自丁香园站友 @吃 rou 不吃草)图片来源:soogif.com@向兔子靠齐吧:排除待遇等其他因素只考虑主观意愿的话,我最初是想学工科的,物理啊电气工程啊只要是动手的都有兴趣,学了医后。。。觉得最初的想法是对的,现在唯一的爱好就是摄影, ...

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倒计时 30 天:为了考研,你到底有多拼? | 唠唠

考研不易。有人为了考研,披星戴月;有人为了考研,猛灌咖啡。无论努力到什么程度,为了梦想,都不过分。你呢?为了考研,你到底有多拼?@dyr321: 怀孕马上七个月。每天晚上11点半睡觉,八点起床,工作早晨八点到下午三点。下班了去大着肚子去自习室,每天都会学习,不知道结果如何,也不在乎结果如何。@ldy0558:最简单的表达:把女朋友考分手了!瘦了十几斤!最后三个月,好像就干了四件事,吃饭睡觉学习上厕所,停止一切体育爱好!以倒数第一的 ...

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如何一边读博一边赚钱?| 征稿

读博补助少,想不想赚点零花钱呢?还真有一个机会,还不错哦。我们需要这样的文章可以是最新进展,比如 CNS 有啥重磅消息,行业内有啥动态,某某论文被撤回等最新八卦。可以是科学人物,你身边的饶毅教授或是某位历史大咖,你要是能八卦出点新闻,都是欢迎的。可是是趣味研究,动物界的一夫一妻制,在生活中发现美也是可以的。可以是实验类的步骤、心得或经验,当然有图有真相是最好的,至少要有正确的操作流程哦。可以是论文类的写作、投稿等经验,最好是 ...

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献给初学者:如何从小白成为扎细胞小能手

看到了很多做分子细胞的小伙伴分享了经验心得,今天也想来试着分享一下神经电生理(在此仅指急性脑切片膜片钳技术)方面的一些小经验。实践篇——知其然扎细胞的基本操作步骤:1)配好 ACSF 充氧(tip:氧要饱和!根据实验对象、目的、课题设计等各种主客观情况选用合适的方法技术)2)打开各种仪器。基本就是循环灌流系统(简单地说就是蠕动泵,使脑片记录槽中氧饱和的人工脑脊液不断更换,可防止脑片细菌滋生)、显微观察系统(tip:Olympus ...

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献给初学者:如何用生信办法确定蛋白表达调控关系

实验中发现两个蛋白的表达有调控关系,如何用生信方法确认?以下几步简单粗暴,不得不试 (文字少,全是干图)先看两个蛋白有没有直接相互作用1. 肯定要先试试最著名的 STRING 了。STRING 官网 http://string-db.org。在首页左侧边栏中,选择 Multiple proteins,在右边输入框中输入蛋白名称和研究对象种类。随后不停的 continue,就能看到结果了。根据两个蛋白之间连线的颜色,可以判定两个蛋白的可能相互作用类型(K ...

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计量可视化分析——科学研究起步的秘密武器

前段时间在某杂志上,看到这样一篇文献:「词频分析」、「词篇矩阵」和「共现矩阵」说得好高大上,有木有?出于好奇,到 CNKI 按照该文献方法,自己分析了一次。哇塞!真的是如获至宝,在此拿出来跟大家分享一下。01 知网检索选择「高级搜索」,之后的界面由于本人研究「地中海贫血」,就以此为例。当然,你也可以使用诸如糖尿病、高血压,恶性肿瘤…… 大部分科研小犊儿,甚是关心期刊杂志发表情况,在此本人点选了「期刊」,当然,你也可以点选「文献」,根据个人需要吧。根据 ...

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如何用 PubChem 数据库搜到目标化合物相关文献和专利?

摘要在生物领域中经常会遇到找化合物相关的生物文献、专利,甚至是检测一个结构为何物的情况,这对学生物的学生来说简直就是灾难。今天为大家介绍的 PubChem 数据库可以让大家的困扰迎刃而解。PubChem 隶属 NCBI 数据库的子数据库,是专门针对化学结构搜索的数据库,使用方便而且是免费数据库,让初学者走上生物信息检索的巅峰。首先,打开网页。1利用 BioAssay 检测生物相关的文献。在输入框中可以输入化合物的名字或者 CAS 号,点击搜索可 ...

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学霸唠唠 | 作为医生,朋友圈遇「错误疗法」提不提醒?

在朋友圈,如果你看到好朋友照顾孩子的一些方法不对,或者疾病应对的方法不对,你会怎么做?有没有觉得两难?说或者不说,感觉都不好?有时候觉得吧,很多人还是很不听你解释的,有种:学医救不了中国人,如此的悲观感受。@Calendra:关系好的就说,关系一般懒得理,有些人嘴上应着,转头就屏蔽你说你八婆,乱说。@职称管家:先不说方式的正确与否。并不是别人难,而是你的心理难。是你的主观意识选择别人的方式不符合你心中的方式,你会选择难受。 ...

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这款软件量化 NB 结果图,简单粗暴 | 论文写作

本人做 NB 实验有那么一段时时时间了,之前苦于量化 NB 图无门道,走过不少弯路。目前虽软件多多,但无几个简单粗暴有效易上手合我心意的软件,直到偶然机会遇见了IJ 软件 Image J(本人喜欢叫它 IJ 软件 )。下面为本人总结的量化 NB 图教程(如有错漏,请各位同行大佬批评指正)1. 启动你的大 IJ,打开一张 NB 图,强迫症的我向右拉伸对其一下 NB 图,就出现了左边黑色条条了。 2. 然后将 NB 图转为 8-bit 的灰度图,路径:Image-Type-8bit(把彩色去掉,这里是黑白所以没什么变化 ...

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