糖含量测定

实验原理】
苯酚—硫酸 试剂 与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应，己糖在490nm处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。

【实验材料】
1. 实验器材
721型分光光度计。
2. 实验 试剂
(1) 98％ 的浓硫酸。
(2) 80％ 苯酚：80g苯酚加20ml水使之溶解，可置冰箱中避光长期贮存。
(3) 6％ 苯酚：临用前用80％苯酚配制。
(4) 标准葡萄糖溶液（0.1 mg/ml）：取100mg葡萄糖，用蒸馏水溶解，定容至1L。
(5) 多糖样品：半乳葡萄甘露聚糖溶液（0.1 mg/ml）。

【实验操作】
1. 制作标准曲线：
取9支干燥 试管 ，按下表操作

 

管号	0	1	2	3	4	5	6	7	8
标准溶液（ml）	0	0.4	0.6	0.8	1.0	1.2	1.4	1.6	1.8
蒸馏 水（ml）	2.0	1.6	1.4	1.2	1.0	0.8	0.6	0.4	0.2
6％苯酚（ml）	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
浓硫酸（ml）	5	5	5	5	5	5	5	5	5
静止10分钟，摇匀，室温放置20分钟
A 490

横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，绘制标准曲线。
2. 样品含量测定：
取样品液1.0ml，按上述步骤操作，测光密度。

3．计算:
糖含量(%)=C /（C0× V）×100%
C: 由标准曲线查得的糖微克数
C0：样品溶液的浓度（0.1 mg/ml）
V：测定时用的样品溶液体积（1.0ml）