GST融合蛋白表达的问题，很怪，请高手热烈讨论

今天进行了GST融合蛋白的表达，pGEX-4T-1载体,BL21菌。
步骤：摇菌至A600：0.7，然后加IPTG诱导3小时，温度35度（终浓度：0.3mM)，取1ml诱导后菌，离心去培养基，冰冷PBS洗一次，离心，吸净液体，加入undefined上样缓冲液50微升和终浓度1mM PMSF，100度煮菌5分钟，离心，取20微升上清跑胶。结果如图。
1.空载体对照有GST的表达
2.所有重组载体同样有GST大小的片断，（箭头 B）
3.箭头A所示的条带在空载体和重组载体处有明显差异。
4.我的目的蛋白为44KD，融合后应为73KD，但是没有见到表达.
综合分析会是什么原因？该蛋白国外已在pQE30载体上表达成功，应该不会是稀有密码的原因造成表达终止吧？第1号和3号克隆已测序，表达框没有移码，基因全长正确。测序结果如下，请参考：
AAATCGGATCTGGTTCCGCGTGGATCCCCGGAATTCCCGGGTCGACATGATACAAGTACTGATGGCTGCTGCAAGCTTTG
GCCAAACTAAAATCCCCCGGGGAAATGGGCCTTATTCCGTTGGTTGTACAGACTTAATGTTTGATCACACTAATAAGGGC
ACCTTCTTGCGTTTATATTATCCATCCCAAGATAATGATCGCCTTGACACCCTTTGGATCCCAAATAAAGAATATTTTTG
GGGTCTTAGCAAATTTCTTGGAACACACTGGCTTATGGGCAACATTTTGAGGTTACTCTTTGGTTCAATGACAACTCCTG
CAAACTGGAATTCCCCTCTGAGGCCCGGTGAAAAATATCCACTTGTTGTTTTTTCTCATGGTCTTGGGGCATTCAGGACA
CTTTATTCTGCTATTGGCATTGACCTGGCATCTCATGGGTTTATAGTTGCTGCTGTAGAACACAGGGATAGATCTGCATC
TGCAACTTACTATTTCAAGGACCAATCTGCTGCAGAAATAGGGGACAAGTCTTGGCTCTACCTTAGAACCCTGAAACAAG
AGGAGGAGACACATATACGAAATGAGCAGGTACGGCAAAGAGCAAAAGAATGTTCCCAAGCTCTCAGTCTGATTCTTGAC
ATTGATCATGGAAAGCCAGTGAAGAATGCATTAGATTTAAAGTTTGATATGGAACAACTGAAGGACTCTATTGATAGGGA
AAAAATAGCAGTAATTGGACATTCTTTTGGTGGAGCAACGGTTATTCAGACTCTTAGTGAAGATCAGAGATTCAGATGTG
GTATTGCCCTGGATGCATGGATGTTTCCACTGGGTGATGAAGTATATTCCAGAATTCCTCAGCCCCTCTTTTTTATCAAC
TCTGAATATTTCCAATATCCTGCTAATATCATAAAAATGAAAAAATGCTACTCACCTGATAAAGAAAGAAAGATGATTAC
AATCAGGGGTTCAGTCCACCAGAATTTTGCTGACTTCACTTTTGCAACTGGCAAAATAATTGGACACATGCTCAAATTAA
AGGGAGACATAGATTCAAATGCAGCTATTGATCTTAGCAACAAAGCTTCATTAGCATTCTTACAAAAGCATTTAGGACTT
CACAAAGATTTTGATCAGTGGGACTGCTTGATTGAAGGAGATGATGAGAATCTTATTCCAGGGACCAACATTAACACAAC
CAATCAACACATCATGTTACAGAACTCTTCAGGAATAGAGAAATACAATTAGGCGGCCGCATCGTGACTGACTGACGATC
TGCCTCGCGCGTTTCGGTGATGACGGTGG
请高手一定要帮我看看，到底是什么原因，融合蛋白没有表达？谢谢