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常用免疫试剂的配制方法

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常用免疫试剂的配制方法
1.抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2PBS
NaH2PO4.2H2O 0.39克
Na2HPO4 1.27克
NaCl 0.85克
NaN3 200mg
H2O (蒸馏水) 至 1000ml

2.DAB溶液配制:(组化及Western blot 显色)
称DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCl缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用。
用前加入1%H2O2 1~1.5ml,H202浓度为0.01%,混匀后使用。

3.3,3,5,5,—四甲基联苯胺(TMB)溶液配制:
用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4 ℃ 保存半年以内使用。
使用前,用pH5.0磷酸—柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mgTMB)1%TMB液,再按每毫升TMB加入1μl30% H2O2混匀后立即使用。
2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。
(责任编辑:大汉昆仑王)
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